目的 本实验旨在研究胚胎大鼠脊髓源神经干细胞在RNA干扰Hies1基因后定向诱导分化为胆碱能神经元过程中Mash1基因的表达变化,探讨神经干细胞的定向分化机制。方法 神经干细胞取自孕龄17d的Wistar胚胎大鼠脊髓,接种到含EGF和bFGF的限定性无血清培养液中培养,待原代克隆球形成后,分两组实验,第一组：加入诱导因子RA、SHH、NT-3和BDNF对神经干细胞进行诱导分化,第二组：首先对Hes1基因进行RNA干扰,之后用同样的方法进行诱导分化。然后,应用实时定量PCR技术分析神经干细胞在向胆碱能神经元诱导分化过程中Hes1和Mash1的表达变化情况以及干扰Hes1基因后诱导分化过程中Mash1基因的表达变化。结果 Hes1和Mash1基因在神经干细胞整个培养过程中均有表达,诱导1 w时各基因均较对照组表达下降,诱导2w时表达较诱导1 w时增高,但低于对照组。在进行RNAi后,Hes1基因表达低,Mash1基因均较未干扰组表达高,且较单纯诱导组也高。结论 Hes1和Mash1基因参与了神经干细胞向胆碱能神经元的分化过程并发挥了重要的作用,且二者呈负调控关系。