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本试验用从临床型乳房炎奶样中分离筛选出的毒力及交叉免疫原性强的无乳链球菌(W271)、停乳链球菌(T2531)和金黄色葡萄球菌(J84184)3株优势血清型菌株，制备每剂量(5ml)中含三种菌的抗原浓度分别为2.5×109cfu、5×109cfu、1×1010cfu和2×1010cfu的4种氢氧化铝灭活多联苗，将每种疫苗各肩胛部肌肉免疫4头牛，每头牛免疫2次(0d和14d)，每次5ml，分别于免疫前和免疫后第28d采血，用问接ELISA方法检测免疫前和免疫后血清抗体水平，结果表明，免疫剂量与抗体滴度具有显著相关性，随着菌苗中3种菌抗原浓度的增加，免疫后的三种菌的血清抗体水平亦增加。在上面试验基础上，分别选择4种苗免疫后抗体效价为免前2倍和4倍的牛各4头，作为实验组，同时选体况相似，未进行免疫的3头牛作为对照，进行免疫攻毒保护检验。用无乳链球菌(W117)、停乳链球菌(T1030)和金黄色葡萄球菌(J88014)，以最小人工感染剂量进行免疫攻毒保护试验，结果表明，血清抗体滴度与免疫攻毒保护效果具有显著相关性，当免疫后抗体水平达到免疫前的2倍以上时，免疫后的奶牛即具有较好的保护效力。