发酵乳杆菌来源L-阿拉伯糖异构酶(LFAI)的晶体制备与衍射分析

来源 :中国工程院化工、冶金与材料工程学部第九届学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tanya_33
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  发酵乳杆菌(lactobacillus fermentum CGMCC2921)来源L-阿拉伯糖异构酶(简称LFAI)可以高效催化D-半乳糖生产D-塔格糖,该酶具有工业化应用的潜力.通过外源表达以及三步酶纯化过程(分别为镍亲和柱纯化、阴离子交换柱纯化和凝胶分子筛纯化),成功得到了电泳纯的均一LFAI蛋白.利用商品化的结晶筛选试剂盒确定了晶体生长的基本条件,并通过对结晶条件的进一步优化获得了高品质的LFAI蛋白质单晶.利用上海光源同步辐射系统成功采集到了分辨率3.3 (A)的衍射数据,经过多种计算机软件的处理最终确定了LFAI全酶的低分辨率晶体结构.这是首次报道嗜热型L-AI的晶体结构,为揭示L-AI家族的结构特点和催化机制提供了借鉴.
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