【摘 要】
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目的:构建以HREAFP杂合启动子和MLP晚期启动子调控、含蜂毒素(Melittin)基因的重组增殖型腺病毒，观察其特异性抑制肝癌细胞增殖的作用。方法:将质粒pENTR-MLP-Melittin与腺病毒骨架质粒pPE3-F11B通过LR重组，并与含有杂合启动子HRBAFP的质粒PXC20-△E1b-55kda-HEAFP共同转染人胚肾293细胞，得到由HREAFP调控E1a区，E1b区缺失55kd
【机 构】
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第二军医大学附属长海医院中医科 上海 第二军医大学附属东方肝胆外科医院病毒和基因治疗实验室 上海
【出 处】
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第七次全国中西医结合中青年学术研讨会暨福建中西医结合研究院2009年学术年会
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目的:构建以HREAFP杂合启动子和MLP晚期启动子调控、含蜂毒素(Melittin)基因的重组增殖型腺病毒，观察其特异性抑制肝癌细胞增殖的作用。
方法:将质粒pENTR-MLP-Melittin与腺病毒骨架质粒pPE3-F11B通过LR重组，并与含有杂合启动子HRBAFP的质粒PXC20-△E1b-55kda-HEAFP共同转染人胚肾293细胞，得到由HREAFP调控E1a区，E1b区缺失55kda蛋白的携Melittin基因的重组增殖型腺病毒QG511-HA-Melittin。观察该病毒在甲胎蛋白阳性、阴性肝癌细胞及正常肝脏细胞内感染、复制增殖情况及对其增殖抑制效果。
结果:成功构建重组增殖型腺病毒QG511-HA-Melittin，其在甲胎蛋白阳性肝癌细胞Hep3B、甲胎蛋白阴性肝癌肝癌细胞SMMC-7721和人正常肝细胞L02中48h的增殖倍数分别为12800倍、130倍和19.6倍。MTT实验表明QG511-HA-Melittin对Hep3B细胞有明显的杀伤作用，与SMM-7721和L02细胞相比差异具有统计学意义(p＜0.05)。
结论:重组增殖型腺病毒QG511-HA-Melittin能特异性地在甲胎蛋白阳性肝癌细胞中增殖，从而抑制宿主细胞的生长。
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