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小麦纹枯病又称小麦尖眼斑病(wheat sharp eyespot),是在世界温带麦区广泛分布的土传真菌病害,主要由禾谷丝核菌[Rhizoctonia cerealisvan der Hoeven(AG-DI融合群)]侵染所致。从20世纪70年代中后期开始,随着小麦品种的更替及高产栽培措施(如早播、密植、高肥等)的推广,该病在我国冬麦区普遍发生,现已成为长江流域及黄淮平原麦区的重要病害。目前,生产上推广的小麦品种对纹枯病的抗性普遍较差,药剂防治成了控制该病害的重要手段。琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂(SDHIs)是被杀菌剂抗性行动委员会新划分出来的一类作用机制和抗性机理相似的化合物,作用机制主要为抑制病原菌琥珀酸脱氢酶活性,从而干扰病菌的呼吸作用。由于该类杀菌剂作用位点单一,其抗性风险备受关注。已有研究结果表明,病原菌对该类药剂的抗性机制主要是琥珀酸脱氢酶B、C、D亚基(sdhB,sdhC,sdhD)发生点突变。噻呋酰胺是一种SDHI,对丝核菌有特效。申请者前期研究结果表明噻呋酰胺对小麦纹枯病菌有很好的离体抑制活性,对病害的田间防治效果也优于常用杀菌剂,说明其在小麦纹枯病防治上具有良好的应用前景。R.cerealis无有性阶段,不产孢子,胞内双核,其对噻呋酰胺抗性机制未有报道。本研究通过紫外诱变的方法获得20株噻呋酰胺抗性突变体,扩增和比较这20株抗性突变体以及其亲本菌株的琥珀酸脱氢酶B、C、D亚基,结果表明:有1株抗性突变体RCSdhB基因的246位氨基酸发生点突变,有6株抗性突变体RCSdhC基因的139位氨基酸发生点突变,还有11株抗性突变体RCSdhD基因的1 16位氨基酸发生点突变。这些突变体的氨基酸突变都是由组氨酸(His,H)突变为酪氨酸(Tyrosine,Y),其中4株为纯合突变体,14株为杂合突变体。还有2株抗性突变体在RCSdhB、RCSdhC和RCSdhD基因上均无突变。测定了这20株抗性突变体对噻呋酰胺、啶酰菌胺、联苯吡菌胺、氟唑菌苯胺和氟酰胺这5种SDHIs杀菌剂的敏感性,结果表明:RCSdhB上的H246Y突变菌株对噻呋酰胺、啶酰菌胺、氟唑菌苯胺都表现中抗,抗性倍数分别为11.0倍,39.0倍和15.3倍,对联苯吡菌胺表现低抗,抗性倍数为4.8;RCSdhC上的H139Y和RCSdhD上的H116Y突变菌株对噻呋酰胺表现中抗,抗性倍数范围为11.5~31.2,对啶酰菌胺、联苯吡菌胺和氟唑菌苯胺都表现为低抗,抗性倍数范围分别为1.3~6.4,2.9~9.5和3.0~7.4。这20株抗性突变体对氟酰胺都表现为敏感。与亲本菌株相比,不同抗性突变体表现出不同的适合度。不同突变体之间的适合度差异与突变基因类型之间无相关性。以上结果表明:小麦纹枯病菌对噻呋酰胺的抗性与RCSdhB、RCSdhC和RCSdhD基因点突变相关。