剑麻是我国热区最重要的纤维作物,剑麻种植地土壤较为贫瘠,需要施用大量的氮肥,但大量氮肥的使用不仅增加了剑麻的种植成本,而且对环境造成了污染。发掘剑麻根际微生物的生物固氮潜力是降低剑麻生产成本的有效手段之一。因此,对我国三大剑麻产区海南昌江、广西钦州、广东湛江的剑麻根际联合固氮菌进行了研究。以Ashby培养基为基础培养基,利用液体培养基进行生物富集,通过平板稀释法和纸张弹布法对剑麻根际土壤固氮菌进行分离筛选,通过凯氏定氮法评价了固氮菌的固氮能力,乙炔还原法测定其固氮酶活性,初步建立一套快速有效筛选固氮菌的体系。结果表明,以Ashby培养基为筛选培养基,平板稀释法和纸张弹布法两种方法均能分离到固氮菌,而采用纸张弹布法可以高效的从土壤中分离筛选到固氮菌,初步建立了一套快速有效筛选固氮菌的体系。通过凯氏定氮法筛选获得102株固氮菌,再经乙炔还原法测定其固氮酶活性,以乙烯生产量表示,最终获得41株高固氮酶活固氮菌,其在无氮培养基上能够有效地还原乙炔,达到1000¹978.3245 nmol C₂H₄/（ml·h）,且不同地区同种菌的固氮酶活性存在一定差异。通过形态特征、生理生化特征和16S r DNA基因序列对固氮菌进行鉴定,41株固氮菌分属于克雷伯氏菌属,芽孢杆菌属,阴沟肠杆菌属,这些菌株可望进一步研究开发成为微生物肥料的生产菌种。