【摘 要】
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钙依赖蛋白激酶(CDPKs)是生长发育信号和逆境信号诱导钙信号的重要信号传递体,在调控植物信号转导途径中下游基因的表达、生理生化代谢等生物学过程中有重要作用.为给进
【机 构】
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林木遗传育种国家重点实验室,中国林业科学研究院林业研究所,北京 10091
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钙依赖蛋白激酶(CDPKs)是生长发育信号和逆境信号诱导钙信号的重要信号传递体,在调控植物信号转导途径中下游基因的表达、生理生化代谢等生物学过程中有重要作用.为给进一步研究CDPK基因在木材形成过程中的作用,本研究在基因组水平上对杨树CDPKs基因家族的成员进行分析,找到32个CDPKs及10个CRKs.同时利用这些基因编码的氨基酸序列与拟南芥中CDPK基因的氨基酸序列构建了系统进化树,与拟南芥一样,杨树CDPK基因家族也可以分为4个亚族.通过对杨树和拟南芥CDPK基因家族成员基因结构比较,发现杨树CDPK基因内含子的插入位置相对比较保守.对CDPK基因家族成员在杨树不同组织、不同节间之间以及毛白杨次生维管发育不同时期的表达特性进行分析,发现.克隆得到了杨树在次生维管组织中CDPK基因家族中三个基因PtCPK1、PtCPK6、PtCPK15,对其组织表达特异性进行分析,发现PtCPK15在各组织中表达量均较高.对这三个基因序列结构分析发现,它们都存在一个跨膜区,随后我们将PtCPK1、PtCPK6及PtCPK15基因分别与YFP构建融合表达载体,注射烟草下表皮叶片瞬时表达研究其亚细胞定位,发现选取的PtCPK1、PtCPK6及PtCPK15都定位在细胞膜上,这与通过序列分析预测的结果一致.随即我们还构建了PtCPK1、PtCPK6、PtCPK15植物表达载体并得到了超表达转基因拟南芥,其中PtCPK15的超表达及RNAi抑制表达载体转化银腺杨84K获得转基因植株.为进一步研究CDPK基因功能奠定了基础.
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