【摘 要】
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近些年来,水溶性阳离子共轭聚合物CCP在生物传感方面的应用引起了广泛关注.CCP具有出色的捕光性能,能与染料分子之间产生有效的荧光共振能量转移FRET,从而实现对标记有染料分
【机 构】
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中国科学院化学研究所,100190,北京
【出 处】
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中国化学会第三届全国生物物理化学会议暨国际华人生物物理化学发展论坛
论文部分内容阅读
近些年来,水溶性阳离子共轭聚合物CCP在生物传感方面的应用引起了广泛关注.CCP具有出色的捕光性能,能与染料分子之间产生有效的荧光共振能量转移FRET,从而实现对标记有染料分子的DNA的高灵敏度检测,我们将其用于基因突变检测与DNA甲基化检测.在基因突变检测中,我们利用CCP与不同染料分子之间的多步FRET发展了基因突变的多重检测方法,将多重PCR与多重单碱基延伸结合,能一管同时检测多个基因突变位点(图1).我们针对KRAS和BRAF的十二个突变设计了合理的单碱基延伸引物,并成功测定了临床样本中KRAS和BRAF的基因突变.在DNA甲基化检测中,通过PCR引入荧光素标记的dNTP,借助CCP与荧光素之间的FRET对甲基化进行检测.根据三个基因的甲基化水平,我们将其划分为三个区间,并分别给每个区间赋予一个数值(图2).经过对三个基因的联合分析,得到一个阈值可进行癌症检测,灵敏度为85.7％.
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