牙鲆甲状腺激素受体TRαA的原核表达和多克隆抗体的制备及其应用

来源 :2009年上海研究生学术论坛——资源、环境与可持续发展 | 被引量 : 0次 | 上传用户:isongnosi
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为研究牙鲆甲状腺激素受体TRαA在牙鲆变态发育过程中的调控作用,将TRαA基因克隆插入融合表达载体pET-30a,并在大肠杆菌Escherichia coliDE3(BL21)中进行诱导表达。表达菌株经1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导4 h后,重组蛋白TRαA表达并形成包涵体。SDS-PAGE和Western blotting检测鉴定表达产物。包涵体经变性后在His-Bind树脂进行亲和层析纯化,柱上复性法对重组蛋白复性,获得纯度较高的目的蛋白,蛋白复性的效果良好。用纯化后的目的蛋白免疫新西兰家兔制备多克隆抗体。Dot blotting检测抗体效价达1:200000,检测证明抗体特异性良好。此外,通过染色质免疫沉淀技术鉴定了在活体细胞中多克隆抗体与TRαA的特异性结合,表明了甲状腺激素通过其受体在体内参与碱性磷酸酶(ALP)基因的转录调控。
其他文献
本文对生态位相近的环状异帽藻(H.circularisquama)和纤细角毛藻(C.gracilis)进行了显微与超微观察,结果发现:环状异帽藻细胞体表被鞘膜,外观呈纺锤形,中心对称,具有板片和黄褐色
生活名言:内勤不闯公堂,官人不下厨房。——李光耀出身于殷实之家新加坡前总理李光耀是新加坡的第四代移民,祖籍在中国广东省大埔县。很早以前,他的曾祖父李博文就飘洋过海到
关于丁型肝炎病毒 ( HDV)在我国的感染状况各地报道不一。笔者对 12 0例乙型肝炎 (乙肝 )患者检测其三项 HDV感染血清标志和肝内 HDVAg,HDV- RNA等病毒复制指标 ,探讨乙肝患
以鲫鱼肌肉为材料,建立了一种简便、准确的反相高效液相色谱法。用于检测鱼肉中伊维菌素的药剂残留量。鲫鱼肌肉中的伊维菌素用乙酸乙酯提取后,45℃下氮气吹干,残渣用(4:1)甲醇-
雕塑同所有的艺术形式一样,审美标准具有不确定性,很难对其优劣审评.由于美是客观存在的,依据存在决定意识的哲学原理,判别“好”的城市雕塑的原则仍然是有的.中国美协雕塑艺
盐城市系非稳定性间日疟区,1971年第2次暴发流行时,疟疾发病率高达22.88%。经过10多年的积极防治,1987年全市发病率降到1/万以下。至1998年,全市9个县(市、区)都通过了省基本消灭疟疾达标考核。现将1988~1998年全市的
大厂回族自治县夏垫镇是紧邻北京的一个少数民族乡镇,西距北京天安门40公里,102国道和京秦电气化铁路横穿全境,行政区划面积48平方公里,共有30个行政村,2.9万人口,其中回族人
本文根据2007年12月-2008年3月采集的热带中东大西洋海域(05°37N-12°01N,29°00W-36°51W)金枪鱼延绳钓兼捕大青鲨生物学数据,研究了大青鲨的繁殖生物学特征。共收集大青鲨30
“南方谈话”并不是一趟像表面看上去那么轻松惬意的旅行,它的目标不是促使改革加速,而是确保改革的持续。“南方谈话”讲话正是中国此后16年历史的基因。这就是88岁的邓小平
2007年4月-2008年4月对上海白莲泾河段水体环境质量进行了调查,取白莲泾上的6个断面,每月大、小潮当日采集各断面水样,获得了该河段水质指标的变化状况。根据监测结果,以DO、CODM