【摘 要】
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目的 观察咖啡因(caffeine)对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)中腺苷A2A受体介导的cAMP-PKA信号通路的调控作用.方法 体外培养大鼠肝星状细胞株HSC
【机 构】
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安徽医科大学药学院,安徽天然药物活性研究省级实验室,安徽省天然药物活性成分工程技术研究中心,国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中药药理实验室”,安徽合肥 230032
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目的 观察咖啡因(caffeine)对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)中腺苷A2A受体介导的cAMP-PKA信号通路的调控作用.方法 体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,给予不同浓度的caffeine,腺苷A2A受体拮抗剂ZM241385,腺苷A2A受体激动剂CGS21680共同培养1h后,除正常组外给予终浓度为200 μmol· L-的乙醛刺激,48h后采用放射免疫分析法测定细胞内cAMP含量,RT-PCR检测每组细胞中PKA活性,Ⅰ型前胶原氨端肽(procollagen Ⅰ N-terminal peptide,PⅠ NP)、Ⅲ型前胶原氨端肽(proeollagenⅢ N-terminal peptide,PⅢNP) mRNA水平,Western blot检测各组细胞中结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)蛋白表达水平.结果 caffeine及ZM241385可显著降低乙醛刺激的HSC内cAMP含量,并且能明显下调PKA活性,以及Procollagen Ⅰ,ProcollagenⅢmRNA,CTGF蛋白过度表达,而CGS21680的作用则相反.caffeine及ZM241385合用CGS21680与单用CGS21680相比,作用可有所逆转.结论 caffeine能显著降低乙醛刺激的HSC内Ⅰ型胶原,Ⅲ型胶原,CTGF的表达水平,其机制可能与其对腺苷A2A受体cAMP-PKA信号通路的抑制有关.
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