由于生物发光共振能量转移(BRET)技术极高的灵敏度及极低的内源背景，近些年来在检测及成像研究领域引起了广泛的关注。针对传统BRET体系中存在的缺点，我们发展了几种BRET体系用于蛋白酶的高灵敏检测。首先，利用人源化的Gaussia荧光素酶(hGluc)作为供体，增强型黄荧光蛋白(eYFP)作为受体，我们系统研究了溶液环境对BRET效率的影响，利用环境的影响我们发现一种增强型的缓冲溶液能极大提高检测肠激酶的性能(检测灵敏度提高10倍及检出限7倍)[1]。进一步地，为了增加供体发射与受体发射的stokes位移，长波长发射的荧光蛋白tdTomato作为hGluc的受体，该体系能很好的抗溶液干扰[2]，且进一步提高了检测蛋白酶的性能。更进一步地我们研究新型纳米粒子对hGluc发光的影响，发现其吸收光谱与hGluc的发射光谱有很大程度的重叠，我们将羧基修饰的富勒烯C60作为hGluc的受体，用于蛋白酶的检测，比传统的BRET体系对同一蛋白酶的检出限优化了20倍以上[3]。我们开发的这些BRET系统有潜力应用于实际样品如血液中的蛋白酶检测及活体成像研究。