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碱性磷酸酶是一种碱性条件下在磷酸酶新陈代谢中对单磷酸酯具有催化水解和转移磷酸根作用的磷酸酶[1]。在生物系统中,碱性磷酸酶功能异常与人类的许多疾病相关,例如骨癌、肝功能异常、乳腺癌、前列腺癌、糖尿病等[2],所以,对于碱性磷酸酶的特异性检测具有重要的意义。我们在这里报道了第一例对于碱性磷酸酶具有特异性识别的双光子荧光探针（TP-Phos）。TP-Phos结构由三部分组成,通过一个自断裂的官能团将碱性磷酸酶识别基团和双光子基团相连接。在本文中,我们特别选择了邻羟基苄醇作为自断裂基团,由于此基团的特殊空间结构,使得探针TP-Phos显示出对于碱性磷酸酶的特异性选择,而对其它磷酸酶,如PTP1B和SHP2,不显示反应活性。