副猪嗜血杆菌主要血清型特异基因的筛选和鉴定

来源 :中国畜牧兽医学会2011学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a_hai1983
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  目的:该研究结果用于PCR诊断方法的靶基因,并建立副猪嗜血杆菌主要致病血清型的PCR诊断方法。方法:材料为标准15株血清型副猪嗜血杆菌菌株,根据OD260/280值检测基因组的含量和纯度,电泳凝胶检测基因组DNA的完整性。结果:通过本实验方法提取基因组DNA在核酸凝胶中显示出比较完整,没有断裂的小片段:OD值的检测,含量约200μg/mL,不含有杂质可以进行下一步的酶切步骤。取2μg的基因组,采用平端内切酶RsaI,可以将基因组酶切成100bp-2000bp大小的片段,在电泳凝胶中表现出弥散的的状态,表明基因组DNA酶切充分。结论:常用于诊断副猪嗜血杆菌的血清学方法即琼脂扩散和间接血凝方法不但操作繁琐,而且特异性差,交叉反应普遍,因此,我们通过SSH技术筛选和鉴定血清型的特异基因,用于PCR诊断方法的靶基因。
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