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目的:研究细胞内高镁对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响及其作用机制.
方法:利用Langendroff灌流装置,采用胶原酶法急性分离单个豚鼠心室肌细胞.应用膜片钳技术,采用细胞贴附模式和膜内面向外模式记录单个L型钙通道电流,观察不同游离镁离子浓度[Mg2+]i(0.9mM、2.7mM、8.1mM、30mM和100mM)对单通道钙电流的影响.
结果:当[Mg2+]i为0.9mM生理值时，膜内面向外模式恢复L型钙通道活性(NPo)至176.5±34.1％ (n=7)。2.7mM、8.1mM、30mM和100mM[Mg2+]i分别恢复NPo至131.1±25.9% (n=6), 64.8±18.1% (n=6，P＜0.05)、24.4±10.4%(n=7，P＜0.01)和23.4±5.0% (n=5，P＜0.01)。[Mg2+]i的升高减弱了L型钙通道活性的恢复。进一步分析高镁对L型通道开放和关闭时间。0.9mM[Mg2+]i作用时，L型钙通道平均开放时间(To)和平均关闭时间(Tc)分别为2.67±0.46ms(n=7)和19.73±4.14ms (n=7)。2.7mM、8.1mM、30mM和100mM[Mg2+]i分别减少To至1.04±0.41(n=7，P＜0.05), 0.66±0.16(n=7，P＜0.01), 0.46±0.07(n=7,P＜0.001)和0.37±0.07(n=7,P＜0.001)。而[Mg2+]i的升高对Tc没有明显影响。
结论:细胞内高镁降低L型钙通道活性，其可能机制是抑制通道平均开放时间。