【摘 要】
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根据已发表的犬瘟热病毒(CDV) Onderstepoort株的序列设计两对引物,以犬瘟热病毒云南株感染的Vero细胞收获病毒提取的总RFIA为摸板,RT-PCR扩增出H基因的939bp,920bp片段和185
【机 构】
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云南农业大学动物科学学院 成都军区疾病预防控制中心
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根据已发表的犬瘟热病毒(CDV) Onderstepoort株的序列设计两对引物,以犬瘟热病毒云南株感染的Vero细胞收获病毒提取的总RFIA为摸板,RT-PCR扩增出H基因的939bp,920bp片段和1859bp的H全基因,双酶切两基因片段,以正确的阅读框架定向克隆于PET-28a(+)中,然后将重组质粒转化宿主菌BL21(DE3) plysS,在35℃1.0mmol/LIPTG诱导下获得良好表达,经SDS-PAGE鉴定,表达的融合蛋白分别约为34KDa,与预期值一致。免疫印迹试验显示,该重组蛋白可被CDV Onderstepoort株多克隆抗体识别,表明该重组蛋白具有天然抗原性。
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