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大肠杆菌O157∶H7对人的致病力较强,感染10个O157∶H7活菌即可致病,导致患者出现剧烈腹痛,引起出血性结肠炎甚至溶血性尿毒综合征、血栓性血小板减少性紫癜等严重的并发症,严重者致人死命.该菌感染暴发流行自1982年以来不断发生并呈上升趋势,已经成为事关食品安全的世界性问题.因而,对大肠杆菌O157∶H7进行快速准确的鉴定显得尤为重要.目前,医学和食品安全检测方面大多采用聚合酶链反应(PCR)技术来鉴定大肠杆菌O157∶H7,但该方法操作步骤较复杂,费时,成本亦比较高.而磷脂脂肪酸(Phospholipid Fatty Acid, PLFA)分析方法鉴定微生物具有操作安全、简单、快速等优点,近年用于医学、防疫学或出入境检验检疫等领域的研究愈来愈多,但PLFA方法应用于土壤中大肠杆菌O157∶H7鉴定方面的研究文献几乎空白.为此,本文运用Sherlock MIS微生物鉴定系统,分析大肠杆菌O157∶H7的PLFAs,探讨该方法对土壤中大肠杆菌O157∶H7鉴定的准确性以及培养基、活化时间等因素对鉴定结果的影响,为监测土壤环境中大肠杆菌O157∶H7及其污染风险提供技术支撑.按照MIDI操作手册中的标准方法,挑取SMAC(Sorbitol MacConkey)培养基上培养获得的大肠杆菌O157∶H7菌株以及经TSBA(TrypticasSoy Broth Agar)培养基进一步活化的大肠杆菌O157∶H7菌株进行皂化、甲基化、萃取、洗涤,然后采用安捷伦6890 N气相色谱测定分析所要鉴定菌株的PLFAs.研究结果表明：不同培养基培养的大肠杆菌O157∶H7对鉴定结果的影响较大,Sherlock MIS微生物鉴定系统对于用SMAC培养基培养的大肠杆菌O157∶H7鉴定结果错误,而使用TSBA培养基活化之后鉴定准确率提高,且鉴定相似指数(SI值)随菌株活化次数增大.根据样品中PLFA的种类和含量,活化2次后的大肠杆菌O157∶H7鉴定结果的SI值达到0.600 ～ 0.674.方差分析结果显示,土壤中获取的大肠杆菌O157∶H7菌株与大肠杆菌O157∶H7纯菌株鉴定的SI值差异不显著,P值为0.557.但在鉴定结果的判断上,系统规定肠杆菌科细菌可信度水平一般需SI≥0.700,且第一选择和第二选择的SI差值大于0.100,则可以认为鉴定成功,鉴定结果为第一选择所列的菌种名；若SI值在0.500 ～ 0.700之间,且第一选择和第二选择的SI差值大于0.100,则表明第一选择与第二选择分开,鉴定可能成功,但第一选择所列的菌种为非典型菌株.本研究中,对大肠杆菌O157∶H7菌株的鉴定效果几乎属于后者范围.上述研究结果也即表明,用Sherlock MIS微生物鉴定系统,根据菌株样品中PLFA的种类和含量鉴定土壤或其他环境样品中大肠杆菌O157∶H7时,SMAC培养基上获得的O157∶H7菌株应在TSBA培养基上活化2次后再进行鉴定,但其操作条件还应进一步完善,提高该方法对大肠杆菌O157∶H7鉴定的灵敏度和准确度.