【摘 要】
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目的:间充质干细胞是一种能自我更新及多向分化的多潜能间质细胞,能向脂肪组织、骨、软骨和肌肉组织分化,因此为治疗学应用带来希望。MicroRNA在许多生物过程中其发挥关键作
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目的:间充质干细胞是一种能自我更新及多向分化的多潜能间质细胞,能向脂肪组织、骨、软骨和肌肉组织分化,因此为治疗学应用带来希望。MicroRNA在许多生物过程中其发挥关键作用,包括细胞增殖,分化和凋亡。我们研究MiR-20a对小鼠C3H10T1/2细胞成骨作用的影响及对骨形成负调节子CKIP-1的调节作用。方法:对贴壁培养的小鼠C3H10T1/2细胞成骨诱导不同时间,ALP、茜素红染色及qRTPCR验证诱导结果,同时观察MiR-20a在诱导过程中表达变化;细胞转染MiR-20amimics,Ckip-1siRNA,荧光显微镜下观察转染效果,qRT-PCR测定过表达及敲低效率;qRT-PCR检测过表达MiR-20a及敲低Ckip-1对细胞成骨分化的影响及对骨形成负调节子Ckip-1基因表达的影响。结果:我们发现成骨标记基因ALP、Runx2、OSX、OCN、BSP随小鼠C3H10T1/2细胞诱导过程逐渐升高,且成骨诱导分化过程中MiR-20a表达上调。过表达MiR-20a促进C3H10T1/2细胞成骨分化,成骨标记基因碱性磷酸酶ALP、RUNT相关因子2(RUNX2)、OSX、骨钙(OCN)涎蛋白(BSP)著高于对照组。此外过表达MiR-20a抑制骨形成负调节子Ckip-1表达;且敲低Ckip-1促进细胞成骨标记基因表达。结论:MiR-20a促进C3H10T1/2细胞成骨分化,并下调骨形成负调节子Ckip-1的表达。
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