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目的:检测人牙髓细胞(dental pulp cells,DPCs)体外培养过程干细胞相关基因Sox2、Oct-4和c-Myc的表达,探讨体外连续培养对干细胞性能的影响.方法:取成人健康阻生第三磨牙或正畸拔除双尖牙牙髓组织,免疫荧光染色检测体外培养组织Sox2、Oct-4和c-Myc的表达,未经体外培养的组织为对照组.组织块接种法培养DPCs,取第0、2和7代细胞,免疫荧光染色和实时定量荧光RT-PCR检测Sox2、Oct-4和c-Myc表达,统计学分析.结果:免疫荧光示Sox2、Oct-4和c-Myc在体外培养4周的组织呈阳性表达,对照组无表达.Sox2、Oct-4和c-Myc荧光表达随传代由细胞核转移到细胞浆,第0和第2代细胞核阳性率差异无统计学意义(P>0.05),第7代细胞核阳性率显著降低(P<0.05).实时定量荧光RT-PCR示Sox2、Oct-4和c-Myc mRNA均随DPCs传代先上升后下降(P<0.05).结论:体外培养微环境可激活DPCs中干细胞相关基因表达.扩增早期的DPCs中Sox2、Oct-4和c-Myc表达水平较高,是应用于口腔再生医学的理想模型.Sox2、Oct-4和c-Myc在DPCs体外连续培养中呈相似的表达模式,可能对细胞多能性维持存在协同调控作用.