目的 病毒安全性是猪源性生物人工肝(BAL)不可忽略的安全问题,所以本研究旨在探讨影响BAL中猪源性逆转录病毒(PERV)透过的因素。方法 构建双循环的新型猪源性BAL,两循环间采用膜孔径为10 nm、20 nm、30 nm和35 nm的血浆成分分离柱以及500 nm膜孔径的血浆过滤柱分隔两循环。反应器内填充将共培养的猪肝细胞骨髓间充质肝细胞或原代猪肝细胞并连续循环72小时,每12小时抽取内、外循环内培养液检测PERV RNA、RT活性以及其体外感染性。结果 500 nm组中,内外循环内PERV检测结果完全相同,提示500 nm血浆滤过柱对PERV并无阻隔作用。在血浆成分交换柱各组中,各时间点内循环中均能检出RNA和RT活性,但是外循环中并未检出RT活性,而随着膜孔径减小,RNA的检出时间逐渐延迟,且内循环RNA水平逐渐增加。各培养液均未发现能够体外感染HEK293细胞。结论 膜孔径小于35 nm的血浆成分交换柱能有效阻挡PERV透过,以此构建的新型BAL具有良好的病毒安全性。此外发现膜孔径、循环时间以及内循环病毒浓度是影响BAL中PERV透过的主要原因。