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目的观察芦荟凝胶(Aloe gel,AG)对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSFb)的增殖活性及胶原蛋白合成的影响。方法胶原酶消化法原代培养人皮肤成纤维细胞,应用单层成纤维细胞传代培养技术培养获得人皮肤成纤维细胞后,将不同量的芦荟凝胶加入到培养液中并作用于人皮肤成纤维细胞后,应用流式细胞仪检测细胞周期,碱水解法检测培养液中羟脯氨酸含量,免疫组化法检测芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞Ⅰ型前胶原表达的影响。实验共分为三部分,第一部分:观察芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞的细胞周期的影响。实验分为空白对照组、量效组、时效组。空白对照组仅加入DMEM培养液,量效组分别加入浓度为5%、10%、15%的含芦荟凝胶的DMEM培养液,孵育24h后检测细胞周期,时效组为加入10%芦荟凝胶培养液,分别培养24h,48h,72h后检测细胞周期。第二部分:芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞培养液中羟脯氨酸含量的影响。实验设空白对照组和实验组,空白对照组仅加入培养液,实验组分别加入浓度为5%、10%、15%的含芦荟凝胶DMEM培养液,继续培养24h,48h,72h后应用碱水解法分别检测其培养液中羟脯氨酸含量。第三部分:观察芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞Ⅰ型前胶原表达的影响。实验设空白对照组和实验组,空白对照组仅加入培养液,实验组加入浓度为10%的含芦荟凝胶培养液,继续培养48h后应用免疫组化法观察HSFbⅠ型前胶原表达情况。结果 1.细胞周期时项分析结果显示量效组经5%、10%浓度芦荟凝胶处理后细胞周期G0/G1期细胞百分率较对照组低(P<0.05),S+G2/M期细胞百分率及增殖指数PI值较对照组增高(P<0.05),浓度为15%的芦荟凝胶培养液处理组成纤维细胞的G0/G1期和S+G2/M期细胞百分率与对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。各芦荟凝胶组之间比较浓度为10%的芦荟凝胶培养液组PI值较其他芦荟组增高(P<0.05),S+G2/M期细胞百分率较对照组明显增高(P<0.05)。时效组检测结果显示在不同时间点检测的细胞周期差异无统计学意义(P>0.05)。2.各浓度芦荟凝胶组在不同时间段时其成纤维细胞培养液中羟脯氨酸含量明显高于空白对照组(P<0.05),各芦荟凝胶组中15%芦荟凝胶组较5%、10%芦荟凝胶组更能增加成纤维细胞培养液中羟脯氨酸含量(P<0.05)。各芦荟凝胶组72h与24h的羟脯氨酸含量相比,差异有统计学意义(P<0.05)。3.经10%浓度芦荟凝胶处理后的成纤维细胞Ⅰ型前胶原表达较空白对照组增加(P<0.05)。结论 1.通过流式细胞仪测定细胞周期分布证实一定浓度的芦荟凝胶作用后的人皮肤成纤维细胞的G0/G1期细胞所占百分率下降,S+G2/M期细胞所占百分率及PI值明显增高,推测其可能作用机制是促使静止态的G0/G1期细胞活跃而向S+G2/M期转变,使DNA合成量增加,从而促进细胞的增殖。2.芦荟凝胶以剂量依赖方式增加培养液中羟脯氨酸含量且在作用后72h达最高水平,免疫组化法显示经芦荟凝胶作用后人皮肤成纤维细胞Ⅰ型前胶原表达也增加。说明AG能有效促进人皮肤成纤维细胞胶原的合成。3.为芦荟凝胶应用于延缓皮肤衰老及皱纹的形成提供了理论依据。