【摘 要】
：
溶藻弧菌是鳗鲡、牙鲆等多种经济鱼类的重要致病菌,对其进行快速准确的检测是其病害防控的前提和基础.核酸适配体是通过SELEX (Systematic evolution of ligands by exponential enrichment)技术筛选出的对靶目标具有较高亲和特异性的寡核苷酸分子,它在分子识别和检测方面有广泛的应用前景.本文利用前期筛选出的溶藻弧菌的核酸适配体,对其进行荧光标记,通过
【机 构】
：
集美大学水产学院,鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心,福建厦门 361021
【出 处】
：
中国鳗鲡现代产业论坛暨国家鳗鲡产业科技创新联盟成立大会
论文部分内容阅读
溶藻弧菌是鳗鲡、牙鲆等多种经济鱼类的重要致病菌,对其进行快速准确的检测是其病害防控的前提和基础.核酸适配体是通过SELEX (Systematic evolution of ligands by exponential enrichment)技术筛选出的对靶目标具有较高亲和特异性的寡核苷酸分子,它在分子识别和检测方面有广泛的应用前景.本文利用前期筛选出的溶藻弧菌的核酸适配体,对其进行荧光标记,通过超微量荧光分光光度计检测其对溶藻弧菌的识别效果,结果发现,该适配体对溶藻弧菌有极显著的亲和特异性(p＜0.01)和识别效果,其对溶藻弧菌的亲和常数为9.42±2.72nM,而对哈维氏弧菌、大肠杆菌、嗜水气单胞菌等菌的亲和作用较弱.相关研究为溶藻弧菌的快速识别检测奠定了较好的基础.
其他文献
比较了长江口降海洄游的鳗鲡雌、雄鱼血清中的14项生化指标及卵黄蛋白原含量的差异，并利用血清生化指标建立了相应的性别判定函数.结果 发现，鳗鲡雌鱼血清中的甘油三酯、低密度脂蛋白、钙离子含量显著低于鳗鲡雄鱼(p＜0.05)，白蛋白、葡萄糖含量显著高于鳗鲡雄鱼(p＜0.05)，而谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、总胆红素、总蛋白、肌酐、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和磷酸根离子的含量在鳗鲡雌、雄鱼间无明
人为或自然因素下都容易出现不同鳗苗混杂的现象,由于鳗鲡苗种在形态上十分相似,从外形很难区分.为了保障鳗农的合法利益和提高养殖效益,促进鳗鲡养殖业的健康发展,急需建立了一种能够在现场就快速、高效使用的鳗鲡种质鉴定方法.本研究利用多重PCR技术,通过比对5种常见鳗鲡养殖种类：日本鳗鲡(Anguilla japonica)、美洲鳗鲡(A.rostrata)、花鳗鲡(A.marmorata)、太平洋双色鳗
采用离体组织培养法结合酶消化法建立了一株欧洲鳗鲡肝脏细胞系(EL),己在体外连续培养48个月以上,稳定传代超过70代.EL细胞系为成纤维细胞形态,可在15～32℃下生长,最适培养温度为27℃,最佳培养基为含10％胎牛血清的L-15,该条件下可在体外生存超过100天.在液氮中保存一个月的细胞复苏后成活率超过70％.细胞染色体分析结果表明,第65代EL细胞系仍是2n=38的正常二倍体细胞系,18SrR
迟钝爱德华菌是大菱鲆、牙鲆、鳗鲡等养殖鱼类的主要病原菌,为了解发病过程中迟钝爱德华菌和鳗鲡的相互作用机制,本试验对迟钝爱德华菌EIB202侵染后鳗鲡肝细胞的蛋白质组进行了差异分析并对该菌与侵染相关的基因PuAH的部分功能进行了研究.一方面,构建迟钝爱德华菌的体外侵染模型,追踪观察细胞病变并由此确定侵染的关键时间点,提取不同侵染时间点的细胞蛋白并利用差异蛋白组技术(iTRAQ)进行分析,找出差异蛋白
“脱粘败血综合症”是我国规模化养殖欧洲鳗鲡、美洲鳗鲡黑仔与幼鳗养殖期的最主要病害,投苗当年的发病率高达90％。我们用蔗糖密度梯度离心的方法从发病鳗鲡的组织匀浆液中纯化到大小约200nm的具囊膜病毒粒子；进一步用EO细胞对病毒进行了细胞分离,出现明显的细胞病变效应(CPE)；对细胞进行超薄切片,电镜观察到同样形态的病毒粒子；提取病毒基因组DNA,利用建立的鳗鲡疱疹病毒的PCR检测方法从感染病毒的细胞
我们首次从养殖鳗鲡的病料中分离到给多国鳗鲡养殖造成巨大损失的鳗鲡疱疹病毒。由于疱疹病毒的致病性与环境，尤其是与水温密切相关，其临床症状也有明显不同。我们针对不同的检测需求，建立了鳗鲡疱疹病毒的PCR、多重PCR、定量PCR、LAMP、ELASA等检测方法。利用建立的检测方法对鳗鲡疱疹病毒进行了分子流行病学调查，结果从患“脱粘”、“红头”、“败血”、“烂鳃”等的鳗鲡病料中都检测到鳗鲡疱疹病毒，其中，
细菌生物膜可抵御宿主免疫系统和抗菌药物的杀伤作用。为研究嗜水气单胞菌生物膜形成机制,使用mini-Tn10转座子诱变系统构建突变文库,筛选出生物膜形成能力显著下降的突变株B188,分子分析显示其突变基因与细胞色素C4(cytC4)具有最高同源性(92％)；进一步的RNAi介导cytC4基因沉默也显著降低了细菌的膜形成能力。比较嗜水气单胞菌野生株和cytC4基因沉默株的生物学特性,结果显示cytC4
β-defensin又称为防御肽,是一类富含半胱氨酸分量小的阳离子多肽.本研究运用RACE-PCR技术获得日本鳗鲡的两个β-defensin序列,并分别命名为Aj-defensin1和Aj-defensin2.其中Aj-defeninl cDNA全长362 bp,开放阅读框192 bp,编码63个氨基酸；Aj-defensin2 cDNA全长368 bp,开放阅读框204 bp,编码67个氨基酸.
以初始体长为(41.54±0.83)cm,体质量为(167.67±13.33)g花鳗鲡作为研究对象,在基础饲料中分别添加200 mg/kg姜黄素(1组)、1000mg/kg丁酸钠(2组)、1000 mg/kg果寡糖(3组)和1000 mg/kg复合中草药提取物(4组)配制成4种等氮等能的试验饲料,基础饲料为对照组(5组)饲料,开展为期60 d的饲养试验,探讨四种功能性饲料添加剂对花鳗鲡非特异性免疫
为研究牛磺酸对花鳗鲡(Anguilla marmorata)幼鳗生长和消化酶活力的影响,在基础饲料中分别添加0％、0.20％、0.40％、0.60％、0.80％的牛磺酸,配制成牛磺酸含量为0.708％、0.908％、1.108％、1.308％、1.508％的5组试验饲料(D1,D2,D3,D4和D5),投喂体质量为85.95g的花鳗鲡幼鳗14周.结果 表明：(1)随着牛磺酸含量的升高,花鳗鲡体质量