【摘 要】
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目的：探讨脊髓损伤后不同时间点激活态Ⅱ型非肌肉肌球蛋白(NMⅡ)的表达量变化趋势和生长锥的形态改变,证实两者的相关性.方法：雌性Wistar大鼠70只,随机分为7组,即正常组、3h组、6h组、12h组、24h组、3d组和7d组,每组10只大鼠.利用Impactor Model-Ⅱ脊髓打击器制备大鼠脊髓胸10损伤模型(10g×25mm).分别于上述7个时间点取材.取出脊髓组织做免疫共沉淀和Weste
【出 处】
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第25届全国脊柱脊髓学术会议暨2013年贵州省骨科年会
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目的：探讨脊髓损伤后不同时间点激活态Ⅱ型非肌肉肌球蛋白(NMⅡ)的表达量变化趋势和生长锥的形态改变,证实两者的相关性.方法：雌性Wistar大鼠70只,随机分为7组,即正常组、3h组、6h组、12h组、24h组、3d组和7d组,每组10只大鼠.利用Impactor Model-Ⅱ脊髓打击器制备大鼠脊髓胸10损伤模型(10g×25mm).分别于上述7个时间点取材.取出脊髓组织做免疫共沉淀和Western-blot检测,半定量分析激活态NMⅡ在不同时间点的表达情况;做免疫组织化学染色,观察脊髓损伤后组织中生长锥的形态改变;做扫描电子显微镜的观察,了解脊髓损伤后相应时间点时生长锥的微观形态改变情况.结果：1.免疫共沉淀与Western-blot。结果:7个组脊髓组织样品提取后进行蛋白浓度测定,获得数据采用单因素ANVOA检验分析数据,结果示各组间的差异具有统计学意义(p＜0.05).脊髓损伤后,随着时间进展,组织中激活态NMⅡ的含量逐渐增加,损伤后3天左右达到峰值.损伤前后总NMⅡ的平均相对灰度值在各组之间没有统计学差异(p＞0.05).2.免疫组织化学结果:正常的神经元胞体形态完整、整体染色均匀、胞核染色清楚、胞体饱满.损伤后脊髓组织的形态结构发生改变,可见细胞间隙增大、细胞排列紊乱.平均光密度数据用单因素ANVOA检验分析数据显示各组间没有统计学差异(p＞0.05),进一步间接证明脊髓损伤前后总NMⅡ的表达量无明显变化.3.扫描电镜结果:正常脊髓组织中,细胞内线粒体形态完整,髓鞘排列整齐,轴突中的微管结构排列整齐,可观察到较为完整的生长锥结构.损伤后的脊髓组织中,轴突内的微管结构排列紊乱,大部分细胞溶解,细胞器肿胀崩解,神经纤维脱髓鞘,未见正常的生长锥形态.结论：脊髓损伤后激活态NMⅡ表达量呈上升趋势,损伤后3天左右达峰值,并且生长锥塌陷与激活态NMⅡ表达增加具有相关性.
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