【摘 要】
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利用抑制消减杂交法(suppression subtractive hybridization,SSH)获得了海带雌、雄配子体差异表达的cDNA片段.构建雄配子体差异表达的cDNA消减文库,经过Southern斑点杂
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利用抑制消减杂交法(suppression subtractive hybridization,SSH)获得了海带雌、雄配子体差异表达的cDNA片段.构建雄配子体差异表达的cDNA消减文库,经过Southern斑点杂交筛选出10个阳性克隆,通过测序及序列分析,发现,其中7个片段与GenBank数据库中已知基因序列无明显同源性,初步判断为新的基因序列.srp基因便是其中的一段基因.根据srp基因的序列进行蛋白同源分析,发现其与点形念珠藻(Nostocpunctiforme)孢子形成蛋白具有30％相似性,故暂拟名为孢子形成相关蛋白基因(sporulation-ralated-protein gene,srp).本实验内容主要包括构建srp基因原核表达载体pET-28a-srp,并将其转化入大肠杆菌BL21中进行表达.目的在于获得重组SRP蛋白质,从而为进一步研究SRP蛋白质的结构和功能奠定基础.
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