论文部分内容阅读
近年由细交链孢菌(Alternaria alternata)侵染引起的金叶女贞黑斑病在河南省南阳市严重发生,对园林景观为害较大.作者从健康金叶女贞植株体内分离对该病有生防潜能的内生细菌,以期为病害生物防治打下基础.从分离的290株内生细菌中,筛选到对病原菌有较强拮抗活性的菌株A71,与病原菌平板对峙培养时抑菌率达75.7％.菌株A71革兰氏染色为阴性,杆状,单端丛生鞭毛,在NA平板上单菌落呈圆形,乳白色,边缘整齐,不透明.该菌具有运动性,能氧化葡萄糖产酸,能还原硝酸盐,水解油脂,利用柠檬酸盐,过氧化氢酶试验呈阳性,V-P试验阳性,不能水解淀粉,不产生H2S；明胶液化试验、淀粉水解试验、吲哚试验及甲基红试验阴性,可在氯化钠浓度小于2％的NA培养液中生长.菌株A71在pH∶6～9和25 ～ 30℃温度条件下生长较好,可利用11种供试碳源(蔗糖、木糖、乳糖、葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、L山梨糖、木糖醇、甘露醇、D-果糖、L-阿拉伯糖)和2种供试氮源(硝酸钾、硫酸铵).利用16SrDNA序列通用引物27F和1492R对菌株A71基因组DNA进行PCR扩增,经测序后确定扩增产物片段为1 420bp(GenBank登录号为JN620415).用BLAST程序进行比较发现,菌株A71的16S rDNA序列与多株Burkholderia cepacia菌株的同源性高达99％ ～ 100％.通过内生菌的形态学特征、生理生化测试及16SrDNA序列分析结果,将菌株A71鉴定为洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia).对金叶女贞喷施菌株A71的NB菌体悬浮液(107cfu/mL),以喷施清水为对照,每处理3个重复.试验结果表明,菌株A71对金叶女贞黑斑病的田间防治效果为54.1％.