【摘 要】
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目的:前期研究发现抗菌增敏剂青蒿琥酯(artesunate,AS)可逆转大肠埃希菌耐药,其分子靶点为大肠埃希菌重要多药外排泵转运子AcrB.本研究拟进一步对AS抑制AcrB的分子机制进行探
【机 构】
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第三军医大学,药学院,重庆,400038
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目的:前期研究发现抗菌增敏剂青蒿琥酯(artesunate,AS)可逆转大肠埃希菌耐药,其分子靶点为大肠埃希菌重要多药外排泵转运子AcrB.本研究拟进一步对AS抑制AcrB的分子机制进行探讨.
方法:在AcrB调节子水平,首先采用real-time PCR明确AS单用和联用氨苄西林(ampicillin,AMP)是否抑制acrB表达,接下来采用real-time PCR检测AS单用和联用AMP是否影响acrB调节基因表达,最后在调节基因缺陷型菌株中明确AS抑制acrB表达的作用靶点;在AcrB操纵元水平,采用生物传感器检测其是否通过结合操纵元而影响acrB表达.
结果:AS单用和联用AMP均显著抑制acrB表达;AS单用和联用AMP均显著抑制acrB上游调节子marA-rob-soxS的表达;AS联合AMP对marA-rob-soxS敲除菌没有增敏作用:生物传感器结果显示AS并不结合acrB操纵元marbox、启动子和终止子,提示其不通过影响操纵元而抑制acrB表达.
结论:AS通过抑制acrB上游调节子marA-rob-soxS的表达,从而减少多药外排泵转运子AcrB的表达,发挥其抗菌增敏作用.
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