猪α-干扰素基因的修饰及其在毕赤酵母中的高效表达

来源 :2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jpy_2008
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为了提高猪α-干扰素基因在毕赤酵母中的表达效率,本研究对猪α-干扰素的7个基因进行了修饰。然后将经改造的猪α-干扰素基因克隆入毕赤酵母分泌型表达载pPICZαC中,电转化毕赤酵母x-33菌株,抗生索ZeocinTM高浓度筛选高抗性转化子。以PCR鉴定阳性重组菌株,筛选出的高拷贝重组菌株通过BMMY培养基,用甲醇诱导表达。SDS-PAGE和Western blot印迹杂交结果证实,表达产物为重组猪α干扰素融合蛋白。薄层扫描与Bradford蛋白总量测定表明:基因修饰后,猪α干扰素融合蛋白的含量为0.3975mg/mL,与没有经过改造的菌株表达量0.08mg/mL比较,干扰素的蛋白含量有了明显的提高。抗病毒活性研究显示,基因修饰后的干扰素抗病毒活性为1.370×109,比修饰前的效价4.04×106提高300倍。
其他文献
目的:克隆并原核表达Modesto株C型副鸡禽杆菌的血凝素基因,鉴定该重组血凝素的生物学活性。 方法:根据GenBank上已发表的Modesto株Apg的血凝素基因序列,设计合成了1对特异性引
会议
通过Sephadex G-50凝胶过滤和反向高效液相色谱(RP-HPLC),从牛蛙(Rana catesbiana)皮肤组织分离到了一种有广泛抗菌活性的多肽,被命名为RCABP。与其它两栖类来源的抗菌肽相比同
会议
从牛蛙皮肤组织中提取总RNA,RT-PCR扩增出ranalexin基因,克隆并测序。将该基因连接到融合表达载体pGEX-3X上,经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达融合蛋白GST-ranalexin。
从自然发生溃疡综合症的南方大口鲶肝、肾和溃烂肌肉中分离到一株病原菌(DKN-1),经人工感染实验证实其为南方大口鲶溃疡综合症的病原菌。对该菌的形态、生理生化检测表明,其为
会议
本研究是为了探索一种更为简便、特异性强、灵敏高的隐孢子虫卵囊DNA抽提方法。通过采用FYA filter paper、Fast DNA(r)SPIN for Soil Kit、UNIQ-10柱式基因组抽提试剂盒三种
会议
采集四川南充、绵阳、乐山等地果桑园中的真菌12株,利用ITS引物扩增并进行测序,构建系统进化树,分析12个真菌样品与已知物种的亲缘关系.结果表明,12个真菌样品扩增出的目的条
研究家畜胎盘肽的主要目的,是将家畜胎盘中丰富的生物活性物质,通过肽的形式传递给动物或人,以增强动物或人体的生物功能,从而探索出一种新型的免疫调节剂,充分利用动物胎盘。本文
利用苏云金芽胞杆菌S-层蛋白CTC表面展示系统研究在细胞表面展示鸡毒霉形体粘附素蛋白PMGA1.2的可行性及其免疫原性,为研制能常温长期保藏和运输的禽用口服疫苗奠定基础。用部
会议
积极的英语教学氛围在很大程度上影响看英语教学的效果,有助于培养学生语言学习的自主性.本文以大学英语教学的微观环境-课堂教学为侧重点,探讨营造积极的教学氛围的有效途径
记得小时候曾看到过上海正威大药房经售的鱼肝油瓶上画一个渔夫,背着一条比他短不了多少的大鱼。那时第一次听到挪威这个国家的名字。此后在想到挪威时就常不免联想到鱼肝油