【摘 要】
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目的 通过细胞表面捕获技术和蛋白质质谱对胃癌多药耐药亚系SGC7901/VCR和SGC7901/ADR及其亲本SGC7901细胞进行分析,探讨CACNA2D1通过蛋白糖基化修饰改变影响胃癌细胞耐
【机 构】
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710032 陕西西安,第四军医大学西京消化病医院消化内科
【出 处】
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The 14th Congress of Gastroenterology China(第十四届全国消化系病学术会议)
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目的 通过细胞表面捕获技术和蛋白质质谱对胃癌多药耐药亚系SGC7901/VCR和SGC7901/ADR及其亲本SGC7901细胞进行分析,探讨CACNA2D1通过蛋白糖基化修饰改变影响胃癌细胞耐药的机制.方法 采用免疫组织化学检测、qRT-PCR和免疫印迹法分别检测胃癌组织、胃癌药物敏感细胞系和耐药细胞系中CACNA2D1的表达.通过构建慢病毒载体建立CACNA2D1过表达和shRNA稳转细胞系；运用药敏和凋亡实验检测细胞体外耐药性改变；运用裸鼠体内成瘤实验检测体内耐药能力.同时通过突变CACNA2D1糖基化位点的方式研究糖基化对于CACNA2D1生物学功能的影响,验证其在多药耐药中的作用机制.结果 CACNA2D1在胃癌组织中的表达水平显著高于其在癌旁组织中的表达,且Kaplan-Meier法结果显示,CACNA2D1的表达与患者的生存期呈负相关.CACNA2D1在胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR、SGC7901/VCR中的表达水平显著高于其亲本细胞SC7901.CACNA2D1在体内、体外的表达改变可影响胃癌细胞对化学治疗药物的敏感性；其在胃癌耐药中的功能主要通过调控蛋白糖基化修饰来发挥作用.结论 糖蛋白CACNA2D1是具有潜在价值并且能够逆转多药耐药的分子靶标,其糖基化在调控胃癌多药耐药的生物学恶性表型中也发挥重要作用,对糖蛋白进行深入研究将有助于进一步阐明蛋白质的糖基化参与胃癌多药耐药的机制.
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