HIV/AIDS合并分枝杆菌感染液体培养法联合分子学方法诊断的研究

来源 :中国工程科技论坛第115场——临床分子诊断暨第二届中国分子诊断技术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shunniu
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  背景 分枝杆菌(MB)感染是HIV/AIDS患者最常见的机会性感染之一,也是HIV/AIDS患者主要的致死原因.因此,早期检测并发现MB感染,及时采取恰当的治疗对提高HIV/AIDS患者的生存率及生存质量,防止MB感染向普通人群扩散具有重要意义.然而,HIV/AIDS患者合并MB感染的临床症状多不典型,且抗酸染色、罗氏培养基等传统检测方法对MB的检出率低,使得大部分HIV患者的MB感染诊断只能依靠临床表现、体格检查、影像学异常等判断,易出现误诊及漏诊.适时、适当地应用新技术可以提高对HIV合并MB感染的诊断.本报告关于综合运用快速培养、PCR及基因芯片技术研究艾滋病合并分枝杆菌感染的情况.目的 应用分枝杆菌液体培养法联合PCR菌种鉴定技术以了解目前华北地区HIV/AIDS患者合并分枝杆菌感染的情况,同时分析HIV/AIDS患者结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌感染的构成比,为临床诊断与治疗提供病原学依据,并对合并分枝杆菌感染的HIV/AIDS患者的临床表现、影像学检查结果和相关实验室检查结果等资料进行分析总结.方法 对2009年3月至2010年12月收治的144例HIV/AIDS患者进行分枝杆菌合并感染的筛查,临床疑似病例应符合下述项目至少一项:1、发热;2、体重减轻;3、影像学异常.利用BACTEC MGIT 960全自动分枝杆菌培养仪及配套MGIT分枝杆菌生长指示培养管和BACTEC 9120血培养仪配合BACTEC Myco/F Lyric培养基对上述144例疑似合并分枝杆菌感染患者的可疑感染部位标本进行分枝杆菌培养,其中包括151份外周血标本及1 10份非外周血标本.所有非外周血标本经前处理后,首先抗酸染色,然后接种至MGIT分枝杆菌生长指示培养管,随后置入BACTEC MGIT 960培养仪.外周血标本经无菌采集直接接种至BACTEC Myco/F Lytic培养基,随后置入BACTEC 9120血培养仪进行培养.仪器报阳的标本经抗酸染色证实为抗酸杆菌后,取少量培养液进行PCR菌种鉴定,所采用的三对特异性引物分别用于扩增分枝杆菌属特异性的hsp65蛋白基因(440bp)、结核分枝杆集所有经确诊合并分枝杆菌感染的HIV/AIDS患者的临床资料、影像学检查结果及相关实验室检查结果进行分析与总结.结果 144例疑似合并分枝杆菌感染患者中,经病原学证实存在分枝杆菌感染的为28例(19.4%),均为分枝杆菌培养阳性,仅5例患者存在初始标本抗酸染色阳性,未发现涂片阳性培养阴性者.28例患者中有14例(50.0%)为肺脏累及,4例(14.3%)为肺外累及,6例(21.4%)为分枝杆菌血症, 4例(14.3%)为肺脏累及和分枝杆菌血症并存.经PCR与基因芯片联合进行菌种鉴定,22例(78.6%)为结核分枝杆菌,6例(21.4%)为鸟胞内分枝杆菌复合体.28例确诊患者的临床表现主要以发热和体重减轻为主,同时伴有血沉增快,其中78.5%的患者CD4+T细胞计数<100个/mL.值得注意的是,28例确诊患者中仅10例有明确的影像学异常,10例患者在确诊分枝杆菌感染之前已经开始抗逆转录病毒治疗,但没有一例患者预防性应用抗结核药物.充分说明实验室培养对HIV/AIDS患者合并分枝杆菌感染的诊断起着不可替代的作用.结论及意义 HIV/AIDS患者合并分枝杆菌感染的状况严重,其中以结核分枝杆菌感染为主,亦有少量非结核分枝杆菌感染的发生.由于HIV/AIDS患者免疫系统严重受损,致使分枝杆菌感染的临床表现及影像学表现均不典型,单靠临床与影像学手段易造成漏诊、误诊.故需要临床医生在实际工作中加大筛查力度,并加强临床与实验室的相互配合.联合应用BACTEC MGIT 960等分枝杆菌液体培养手段和PCR菌种鉴定技术可以提高分枝杆菌感染检出的阳性率并达到菌种快速鉴定的目的.
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