论文部分内容阅读
[研究目的]研究热应激时小肠上皮细胞的生长因子表达和ERK1/2信号通路磷酸化的变化。[方法]以大鼠(体内试验)和IEC-6细胞(体外试验)为研究对象。体内试验：通过直肠温度、红外体表温度、血清皮质激素水平和Hsp70表达水平评价热应激模型。石蜡切片HE染色观察小肠形态结构，基因芯片筛选生长因子相关基因并完成相关生物信息学分析，荧光定量PCR验证生长因子基因表达。体外试验：通过MTT检测细胞活力，筛选热应激条件； 观察细胞形态变化，流式细胞仪检测细胞凋亡率，荧光定量PCR检测生长因子表达。采用抑制剂阻断ERK1/2通路磷酸化，检测细胞凋亡率，western-blot检测ERK1/2磷酸化水平。[结果]体内试验：热应激后大鼠直肠和体表温度均显著升高、血清皮质激素和Hsp70表达水平显著升高，热应激模型成功。热应激导致小肠上皮组织出现明显损伤，生长因子基因表达发生改变。体外试验：热应激导致细胞形态损伤，降低细胞活力，促进细胞凋亡，诱导ERK1/2磷酸化。加入抑制剂后，ERK1/2信号通路的磷酸化被阻断，细胞形态损伤更为严重，细胞凋亡率进一步增加。[结论]热应激引起大鼠小肠和IEC-6细胞损伤，改变生长因子表达水平。ERK1/2信号通路在小肠上皮细胞热应激过程中发挥重要的保护作用，并参与调节生长因子表达。