Rac1表达及其活性对人乳腺癌细胞侵袭力的影响

来源 :湖北省微循环学会第三届会员代表大会暨第八次学术年会、武汉微循环学会第六届会员代表大会暨第十二次学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:suzuzl
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目的:比较Rac1 表达及其活性在正常人乳腺细胞HUMEC,以及不同侵袭能力乳腺癌细胞系MCF-7,MDA-MB-231 中的差异,并观察转染Rac1-siRNA 片段对乳腺癌细胞MCF-7,MDA-MB-231 中Rac1 表达和活性以及细胞侵袭力的影响。 方法:以Western blot和GST Pull down方法分别检测Rac1和active-Rac1在 HUMEC,MCF-7和MDA-MB-231 乳腺细胞系中的表达。利用计算机辅助设计 Rac1 特异性siRNA,体外化学合成Rac1序列特异性双链RNA(dsRNA),以脂质体法转染Rac1-siRNA 至乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231。以Western blot和RT-PCR方法鉴定Rac1-siRNA对Rac1 表达的作用,Transwell实验测定转染前后细胞穿透matrigel的能力。 结果:高侵袭力的MDA-MB-231 乳腺癌细胞系内Rac1 表达量及活性明显高于低中侵袭力的MCF-7 乳腺癌细胞系以及正常人乳腺细胞系HUMEC。转染 Rac1-siRNA 48小时后的乳腺癌细胞系MCF-7,MDA-MB-231中Rac1的mRNA和蛋白水平的表达均被干扰片段有效沉默(P<0.05)。转染Rac1-siRNA 48h后人乳腺癌细胞MCF-7,MDA-MB-231的侵袭力均明显降低(P<0.01)。 结论:Rac1表达及其活性影响人乳腺癌细胞侵袭能力,而Rac1-siRNA能有效抑制人乳腺癌细胞株Rac1 mRNA和蛋白的表达,并降低其侵袭力。
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