【摘 要】
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目的:探讨抑制冰晶产生的冰冻切片的预处理方法,为病理检验、生理生化实验提供最佳方法。对象:SD大鼠4只,双腿的腓肠肌和比目鱼肌,共24块样本,分成3组预处理方法。方法:戊巴
【机 构】
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北京体育大学研究生院; 北京体育大学运动人体科学学院;
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目的:探讨抑制冰晶产生的冰冻切片的预处理方法,为病理检验、生理生化实验提供最佳方法。对象:SD大鼠4只,双腿的腓肠肌和比目鱼肌,共24块样本,分成3组预处理方法。方法:戊巴比妥钠麻醉取材,在蜡板上切成2 mm×2 mm×8 mm的组织块,分别做三种预处理方法:(1)直接投入液氮;(2)用OTC包埋剂包埋后放入预冷的异戊烷15 s;(3)用OTC包埋剂包埋后放入预冷的异戊烷30秒。然后用Leica冰冻切片机-20℃切片,厚度8 um。结果:经OTC包埋剂包埋后放入预冷异戊烷30秒的组织块肌细胞形状最好,且无冰晶产生;冷冻15 s处理的组织块冰晶较多,无论是组织块四周还是内部皆出现冰晶;直接放入液氮的组织块介于两者之间,只在组织块四周出现冰晶。结论:液氮虽然温度低,但冷冻时产生气泡,影响冷冻效果。异戊烷冷冻要超过30 s才会取得较好效果。冷冻时间过短,则效果最差。
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