【摘 要】
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本文旨在构建纳豆芽孢杆菌ure敲除重组载体以研究ure的缺失对纳豆芽孢杆菌(CGMCC No.2801)的生长代谢以及发酵过程中产氨量的影响.通过分析温敏型质粒pKSV7的多克隆位点
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本文旨在构建纳豆芽孢杆菌ure敲除重组载体以研究ure的缺失对纳豆芽孢杆菌(CGMCC No.2801)的生长代谢以及发酵过程中产氨量的影响.通过分析温敏型质粒pKSV7的多克隆位点及ure的上下游序列，确定重组质粒构建的四个酶切位点为Hind Ⅲ (AAGCTT)、Xho I(CTCGAG)、Sal I(GTCGAC)和BamH I(GGATCC).以CGMCC No.2801为模板，设计引物并引入四个酶切位点，通过PCR扩增得到ure上下游片段，酶切酶连将两片段连到pKSV7质粒上构建敲除ure的重组载体，目前构建好用于CGMCC No.2801 ure缺失菌株构建的重组载体，该载体将转化入CGMCC No.2801中构建ure缺失型的纳豆芽孢杆菌工程菌，为生产低产氨纳豆发酵菌奠定基础.
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