检测蓝舌病病毒双抗夹心ELISA方法的建立及应用

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shhgay
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将纯化的蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)与弗氏佐剂乳化后,免疫6周龄BALB/c小鼠。分离免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,经BTV-ELISA、BTV VP7-ELISA和BHK-ELISA筛选,得到了3株可以稳定分泌抗BTVVP7特异性单抗的杂交瘤细胞株(1F5、4E5和6A1)。用纯化的BTV免疫家兔,按常规方法制备BTV多抗。选用抗VP7单抗(IF5)包被ELISA板,用兔抗BTV多抗作为捕获抗体,建立了检测BTV双抗夹心ELISA方法。用ELISA分别检测BTV、鹿流行性出血病病毒、水泡性口炎病毒、赤羽病病毒、小反刍兽疫病毒阳性样品,用RT-PCR作对照,结果表明ELISA具有良好的特异性。用ELISA和RT-PCR同时检测259份临床样品,结果表明ELISA的特异性和敏感性分别为99.1%和85.7%,两种方法的符合率为97.7%。
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