哺乳动物胚胎培养液用量小，4℃冷藏保存时间短且易污染;一次配制的培养液是否可以分装于小管-20℃下储存2-3个月后再使用，在此方面文献鲜有报道。开展胚胎培养液冷冻保存，探究在平衡时间上进行延长，一次性配制较多培养液进行长期保存，可以避免了小量配制时的称量误差，省去了频繁配制和细菌污染的麻烦，有效利用试剂，减少浪费，减小先后不同配制的试剂对试验的误差。对此我们设计了两个试验，试验一：旨在比较-20℃和4℃条件下储藏的猪胚胎培养液对猪孤雌胚胎早期发育的影响：将配制好的胚胎培液基分装，随机放到-20℃冻存和4℃冷藏7d到6个月时间。在进行猪卵母细胞体外成熟孤雌激活前，先从2组分别取出部分，做好胚胎培养液滴后放入38.5℃的二氧化碳培养箱分别预平衡4h之后进行胚胎体外培养。在培养第48h和168h观察胚胎发育，计算卵裂教和囊胚率。试验二：旨在比较同等条件下储藏(-20℃和4℃)的猪胚胎培养液在分别平衡4h，24h，48h后对猪孤雌胚胎早期发育的影响：将配制好的胚胎培液液分装，随机放到-20℃冻存和4℃冷藏7d到6个月时间。在进行猪卵母细胞体外成熟孤雌激活前，做好胚胎培养液滴后放入38.5℃的二氧化碳培养箱分别预平衡4h，24h，48h之后进行胚胎体外培养。在培养第48h和168h观察胚胎发育，计算卵裂数和囊胚率。对于卵裂率，囊胚率，使用SPSS(Version 11.0)进行x2检验，P＜0.05时即认为差异显著。其结果如下：(1)经4℃冷藏和-20℃冷冻保存的胚胎培养液对卵母细胞孤雌胚胎培养其囊胚发育率无显著差异(15.29％±0.10 vs 17.51％±0.13，P＞0.05)。(2)在4℃冷藏猪胚胎培养液试验前平衡4h，24h，48h对猪卵母细胞体外成熟后孤雌激活胚胎培养其囊胚发育率无显著差异(18.15％±0.13 vs 11.91％土0.04 vs15.34％±0.10，P＞0.05)。(3)在-20℃冷冻保存的猪胚胎培养液试验前平衡4h，24h，48h对猪卵母细胞体外成熟后孤雌激活胚胎培养其囊胚发育率无显著差异(20.35％±0.17 vs 13.11％±0.06 vs 19.16％±0.14，P＞0.05)。结果表明①在-20℃冷冻保存猪的卵母细胞孤雌胚胎培养液是可行的。②不论是4℃冷藏还是-20℃冷冻保存在的猪胚胎培养液试验前平衡24h，48h都是可行的。