细粒棘球蚴Eg95s单克隆抗体的制备和鉴定

来源 :中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:duoduo5211314
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本研究以具有良好抗原性的截短的重组细粒棘球蚴Eg95s蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,同时以杆状病毒表达的Eg95蛋白作为抗原进行间接ELISA筛选,并经过3轮单克隆后,最终得到了12株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株485、4A5、4E7、4F7、3D7、3E7、3A6、3D6、386、3H5、3C7、3H7。间接ELISA方法检测其效价细胞培养上清为1.28×104~3.2×103,小鼠腹水效价为212~214。单克隆抗体亚型鉴定试剂盒的鉴定结果显示,所有12株均为IgG1亚类,而且所有单克隆抗体的轻链均为K链。间接免疫荧光试验证明,12株单抗均能与感染表达Eg95重组杆状病毒的昆虫细胞产生特异性反应,为进一步研究Eg95s蛋白的结构特性及细粒棘球病的早期诊断奠定基础。
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