耐盐耐高温木霉菌TW22657的分离鉴定及其对黄瓜抗菌促生作用

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木霉属真菌是自然界广泛存在的土壤习居真菌,目前在植物病害生物防治中研究和应用最多,因其生境广泛、对营养条件要求不严格,易在人工条件下被分离、培养,并对多种植物病原菌表现出拮抗作用等特点,被认为是一种理想的生防微生物。然而土壤盐渍化、极端温度等胁迫因子是干扰生防木霉菌生长和繁殖的主要逆境因子,只有获得高抗逆性的多功能生防木霉菌株,才能确保其在促进植物生长、防治植物病害中稳定的发挥作用。笔者实验室从山东潍坊、东营、海阳、威海、黄海等滨海盐地采集了120个盐渍土样品,采用稀释平板法从这些盐渍土壤中分离出83个木霉菌株。以分离获得的83个木霉菌株为试材,采用平板对峙法初筛获得32个对水稻立枯病菌、黄瓜枯萎病菌、终极腐霉病菌和黄瓜灰霉病菌拮抗效果均在70.00%以上的木霉菌株。将32个具有较高拮抗活性的木霉菌株通过盐胁迫(菌株在含盐2.3%的PDA平板上培养72h筛选出耐盐率高于60.00%的木霉菌株)筛选到10个木霉菌株,最后通过60℃耐高温试验,筛选到一株多功能木霉菌株TW22657。TW22657对黄瓜枯萎病菌96h的平板抑制率为100%,对终极腐霉病菌96h的平板抑制率为85.29%,对黄瓜灰霉病菌96h的平板抑制率为72.50%,对水稻立枯病菌72h的平板抑制率为70.67%,盐胁迫72h的耐盐率为64.13%。通过室内种子萌发实验测定了TW22657的孢子悬浮液(×10~8 CFU/mL)能够显著提高黄瓜种子的发芽率81.33%,而对照发芽率仅为65.67%。盆栽实验结果表明,施用TW22657对黄瓜生长有一定的促生作用,30天黄瓜的株高比对照提高了23.81%,黄瓜鲜重提高了34.51%。盆栽黄瓜发病第14天TW22657对黄瓜枯萎病防治效果为85.10%。综上,本研究筛选的抗逆性多功能木霉菌株对补充生防木霉资源及该菌株将来在实际中的应用提供了重要的理论依据。
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