【摘 要】
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溶菌酶是自然界中广泛存在的具有抗菌效应的分子,它在无脊椎动物的免疫反应中发挥着重要的作用.通过RT-PCR技术,从海湾扇贝中扩增出g型溶菌酶基因的成熟肽编码区,将其克隆到
【机 构】
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中国科学院海洋研究所实验海洋生物学开放实验室,青岛,266071
【出 处】
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国家“863”计划资源环境技术领域第三届海洋生物高技术论坛
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溶菌酶是自然界中广泛存在的具有抗菌效应的分子,它在无脊椎动物的免疫反应中发挥着重要的作用.通过RT-PCR技术,从海湾扇贝中扩增出g型溶菌酶基因的成熟肽编码区,将其克隆到巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,构建重组表达质粒pPIC9K-Lsz,经SacⅠ酶切线性化后,采用PEG方法转化毕赤酵母宿主菌GS115获得阳性克隆.阳性克隆经G418筛选获得多拷贝重组子,0.5﹪甲醇诱导表达发现重组海湾扇贝g型溶菌酶在α因子的引导下,分泌到培养基中,表达产物在分子量20K处有一条特异性的条带.抑菌试验显示重组产物具有广谱抗菌活性,其对革兰氏阳性菌的抑菌效果强于革兰氏阴性菌,本实验结果为进一步研究海湾扇贝g型溶菌酶的功能和活性,为研制新型的具有抗微生物活性的药物和在水产养殖业上作为替代抗菌素的新型病害预防治疗制剂奠定了基础.
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