鸡传染性贫血病病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

来源 :中国畜牧兽医学会家畜内科学会2014年学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bae2009
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  鸡传染性贫血病(chicken infectious anemia,CIA)又称蓝翅病、出血综合征或贫血性皮炎综合征,是由鸡传染性贫血病毒(chicken infectious anemia virus,CIAV)引起的以雏鸡再生障碍性贫血和全身性淋巴组织萎缩为主要特征的免疫抑制病.目前,CIA的诊断方法主要包括:病毒分离与鉴定、PCR诊断方法、巢式PCR、间接免疫荧光法、酶联免疫吸附试验、免疫过氧化物酶法、病毒中和试验,核酸探针技术等.但这些方法虽各有优点,但在敏感性、特异性和时效性等方面均存在自身不足.荧光定量PCR技术具有快速、灵敏、特异性强、可定量等优点,非常适用于病毒感染的检测,尤其是早期感染检测.本研究根据CIAV基因组保守区域设计一对特异性引物和探针,通过优化反应条件,建立了一种快速检测CIAV的Taqman荧光定量PCR方法,同时验证其特异性、灵敏性和重复性.结果显示,本试验建立的Taqman荧光定量PCR方法灵敏度可达1.8×101拷贝/μl,远高于常规PCR方法;并与禽类其他病毒性疾病无交叉反应,具有高特异性.本研究建立的Taqman荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可同时检测大量临床样品,适用于CAV的诊断与流行病学分析.
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