【摘 要】
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目的 构建不同片段长度的人PNPLA3基因上游启动子区的荧光素酶报告基因载体,并在HEPG2,L02和HEK293细胞中比较不同长度启动子片段的相对荧光素酶活性以确定PNPLA3基因上
【机 构】
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中山大学附属第三医院内分泌与代谢病学科
【出 处】
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2013年广东省医学会内分泌学/糖尿病学学术年会
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目的 构建不同片段长度的人PNPLA3基因上游启动子区的荧光素酶报告基因载体,并在HEPG2,L02和HEK293细胞中比较不同长度启动子片段的相对荧光素酶活性以确定PNPLA3基因上游启动子区的主要转录调控区,进一步运用在线分析软件预测PNPLA3基因主要转录调控区的潜在转录因子结合位点,为研究PNPLA3基因的转录调控机制打下初步基础。方法 利用PCR及酶切方法,以人外周血中全基因组DNA为模版扩增不同长度的PNPLA3基因上游启动子区序列,通过酶切鉴定及测序分析无误后,与PGL3-Basic载体的虫荧光素酶基因连接。瞬时转染HEPG2,L02和HEK293细胞,利用双荧光素酶报告基因分析系统检测各启动子的转录活性。利用在线分析软件预测PNPLA3基因主要转录调控区的潜在转录因子结合位点。
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