【摘 要】
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目的：探讨自噬对SDF-1α介导牙髓干细胞迁移的调控效应.方法：有限稀释法原代培养人牙髓干细胞(DPSCs),克隆形成试验、细胞免疫荧光、流式细胞术和多向分化检测鉴定其干细胞
【机 构】
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武汉大学口腔医院,口腔生物学教育部重点实验室
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目的：探讨自噬对SDF-1α介导牙髓干细胞迁移的调控效应.方法：有限稀释法原代培养人牙髓干细胞(DPSCs),克隆形成试验、细胞免疫荧光、流式细胞术和多向分化检测鉴定其干细胞特性.CCK8、划痕和Transwell试验,检测SDF-1α对DPSCs细胞活力和迁移的影响；细胞免疫荧光检测SDF-1α刺激下DPSCs细胞骨架和黏着斑蛋白的改变.细胞免疫荧光、Western blot及透射电镜检测SDF-1α对DPSCs自噬表达水平的影响,并应用自噬抑制剂及激活剂探讨自噬对SDF-1α介导DPSCs迁移的调控效应.结果：分离培养的DPSCs表达间充质干细胞表面标记、具有克隆形成能力以及多向分化潜能.SDF-1α可剂量依赖性促进DPSCs迁移,伴随细胞骨架改建以及黏着斑组装(Vincullin,p-Paxillin,p-FAK).与此同时,SDF-1α可激活DPSCs自噬相关蛋白(Beclin1,LC3,Atg5-Atg12复合体)表达及自噬小体的形成.并且,在SDF-1α刺激DPSCs前用自噬抑制剂或激活剂预处理,发现自噬抑制剂(3-MA,氯喹)预处理,可不同程度阻断SDF-1α激发的DPSCs迁移；而自噬激活剂(Rapamycin)预处理则使DPSCs迁移水平进一步提升.结论：自噬可正向调控SDF-1eα介导的DPSCs迁移.
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