【摘 要】
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本研究以环状异帽藻ITS1区为靶序列设计了一对特异性引物,运用荧光定量PCR方法,对环状异帽藻进行了定性定量检测.以其他九种藻为对照验证其特异性,结果表明,仅含环状异帽
【机 构】
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中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室 上海 200090
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本研究以环状异帽藻ITS1区为靶序列设计了一对特异性引物,运用荧光定量PCR方法,对环状异帽藻进行了定性定量检测.以其他九种藻为对照验证其特异性,结果表明,仅含环状异帽藻DNA模板的样品有扩增,其他藻没有检测到扩增信号.以超声波破碎得到的藻液作为标准品,得到的标准曲线具有高度线性,相关系数R2为0.989,并且可以在30个循环内检测到0.5个细胞.利用该方法建立的标准曲线对模拟现场样品进行定量检测,与显微镜计数结果高度一致.鉴于Real-time PCR方法的特异性、敏感性、快速性和准确性,因此,该方法可以应用于环境中环状异帽藻的快速鉴定和定量检测.此研究有望为沿海环状异帽藻赤潮的实时检测和预报提供技术支持.
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