三聚氰胺致NRK-52e细胞氧化应激与p38MAPK通路介导细胞凋亡的研究

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通过研究三聚氰胺导致大鼠。肾小管上皮细胞氧化损伤的程度和细胞凋亡及Trolox对肾小管上皮细胞的保护作用探讨其细胞的凋亡通路;将三聚氰胺直接溶解于DMEM培养基中,分别稀释至5mg/ml、4mg/ml、3mg/ml、2mg/ml、1mg//ml、0mg/ml,通过MTT实验确定三聚氰胺对该细胞的半数抑制浓度IC50。根据三聚氰胺对该细胞的IC50选择三个剂量4mg/ml、2mg/ml、1mg/ml作为实验组,并每组都设立向对应的Trolox保护组,其中Trolox的终浓度为5mM。用三聚氰胺和Trolox于培养基中混匀作用于细胞8h后,收集细胞培养液并将细胞裂解收集细胞裂解液。进行相关指标的检测和研究;结果表明,三聚氰胺可以降低抗氧化酶的活性,加速细胞的脂质过氧化程度,破坏了细胞膜的完整性。同时,三聚氰胺还可以促进细胞产生过多的活性氧,这也可能是引起细胞损伤的重要因素之一,同时在加入保护剂Trolox后,三聚氰胺造成的氧化损伤程度有所降低,并且trolox可以通过提高抗氧化酶的活性、清除细胞内氧自由基来保护细胞,使细胞凋亡发生的几率降低;此外,三聚氰胺致NRK-52e细胞凋亡可能与p38MAPK通路有关,阻断p38MAPK可以阻断三聚氰胺所致的细胞凋亡现象。
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