牛传染性鼻气管炎病毒LAMP检测方法的建立

来源 :第七届全国牛病防制及产业发展大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sonical
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牛传染性鼻气管炎病毒(BoHV-1)是牛的一种严重的病毒性传染病.本研究建立了一种利用环介导等温扩增(LAMP)技术建立的新的BoHV-1快速检测方法,针对BoHV-1gE基因(GenBank:L27212.1)的序列设计4组特异性LAMP引物,每组引物特异性识别靶基因序列上4个独立区域,利用扩增靶DNA的BestDNA聚合酶水浴孵育,在恒温63℃下50min完成病毒检测,产物通过目视检查使用钙黄绿素检测荧光和琼脂糖凝胶电泳有阶梯状大小不等片段,与牛其他主要病毒性疾病进行了特异性检测,结果证明特异性好.该BoHV-1-lamp法的分析灵敏度可检到0.006ng/μL的BoHV-1基因含量.建立牛传染性鼻气管炎病毒(BoHV-1)的LAMP快速检测方法,可成功检测到临床样本中的BoHV-1基因组.LAMP实时浊度法具有简单快速、灵敏、特异性强的优势,为BoHV-1的临床检测提供了一种快速的试验手段.更适合IBR的诊断和临床现场快速检测.
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