论文部分内容阅读
研究目的:
阻塞性黄疸(OJ),是肝胆系统常见病症,系由各种原因造成的肝内外胆管梗阻造成的胆汁淤积.其主要临床表现为肝胆组织的损害和全身各系统发生的一系列病理生理变化的症候群,至今阻塞性黄疸及其并发症尚缺乏有效的治疗手段.黑果枸杞系茄科枸杞属植物，是中国西北荒漠地区一种特有的、亟待开发的野生植物，药食兼用。已有研究表明，黑果枸杞有滋补肝肾、降低胆固醇、增强免疫的功能，对人体健康颇有益处。已有研究表明，中等强度运动训练可改善机体的免疫功能，提高机体的红细胞免疫能力和粒细胞的吞噬能力，从而在预防炎症的发生、感染性疾病的治疗方面发挥一定促进作用。因此，本研究以阻塞性黄疸构建小鼠肝损伤模型，通过黑果枸杞及中等强度运动康复训练干预治疗，为阻塞性黄疸致重度肝损伤的临床康复应用研究提供理论和实验依据。
研究方法：
1、实验对象及分组
将50只KM小鼠随机分为5组：非干预组、模型组、枸杞、枸杞+运动组、单纯运动组每组10只。
2、阻塞性黄疸模型构建
小鼠均采用手术线直角悬挂胆总管建模，本实验室已成功构建，具体流程略。
3、运动方案及枸杞干预
黑果枸杞由青海地区提供，枸杞+运动组和枸杞组小鼠于术后2天剪断胆总管固定线后开始每天（下午3时）灌胃黑果枸杞1次，剂量0.3ml/次，共6周。运动组、枸杞+运动组小鼠采用0％坡度，速度10m/min每天跑台30min，持续6周，每周休息1天。
4、检测方法
采用ELISA测定HA、LN、PⅢ、ColⅣ含量，免疫组化法检测肝脏组织TNF-α、TGF-β、STAT5b的蛋白表达；RT-PCR技术检测TNF-α、TGF-β、STAT5b表达。
研究结果：
HE染色显示：非干预组肝细胞索排列整齐；模型组大鼠肝细胞大量纤维化，可见大片状肝细胞变性、坏死，乃至肝细胞索结构紊乱；枸杞组、单纯运动组可见肝细胞少量点、片状坏死，肝小叶结构改变，肝索排列欠整齐；枸杞+运动组无明显组织坏死，肝小叶结构基本正常，肝索排列较整齐。血清学结果：枸杞+运动组HA、LN、PⅢ、ColⅣ水平较模型组显著降低（P<0.01），枸杞组、单纯运动组HA、LN、PⅢ、ColⅣ水平也显著下降（P<0.05）。免疫组织化学染色结果显示：枸杞+运动组小鼠肝组织TNF-α、TGF-β、STAT5b表达均显著低于模型组（P<0.01）。RT-PCR结果显示：与模型组比较，枸杞+运动组小鼠血清TNF-α、TGF-β、STAT5b表达降低（P<0.01）。
研究结论：
近年来，随着对阻塞性黄疸致肝损伤的深入研究，细胞因子在其发病机制中的作用越来越受到重视。其中，TNF-α浓度的变化能从不同侧面反映肝细胞受损的程度。TNF-α是一种促炎症因子，具有诱导及增强免疫细胞的功能，而细胞因子和免疫细胞共同维持机体的免疫平衡。本实验结果提示，黑果枸杞和中等强度有氧运动联用对小鼠阻塞性黄疸致重症肝损伤后起保护作用，可能通过调节TNF-α等炎性信号表达，达到增强宿主细胞的免疫及抗感染功能，使机体免疫系统发生适应性改变，免疫应答能力增强，从而明显减轻阻塞性黄疸致小鼠肝损伤的程度。跑台运动、黑果枸杞对小鼠阻塞性黄疸的干预研究具有明显的抑制作用，尤以联合运用效果更佳。其机制可能通过调节TNF-α等炎性信号表达，提高宿主细胞的免疫功能，减轻阻塞性黄疸导致的肝损伤。