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摘要：目的：双黄连口服液由金银花、黄芩、连翘三味药材组成，《中国药典》2010年版中将金银花分列为金银花和山银花，在实际应用中，存在着金银花与山银花药材混用的现象。我们利用近红外光谱法，建立检测双黄连口服液中的山银花一致性模型。一致性检验模型对测试集中的样品检测结果与高效液相色谱法检测结果一致，使用此模型可以检测出含有山银花的样品。
结论：双黄连口服液中的山银花检测一致性检验模型具有简单易操作、方法稳定可行、准确率高等特点，适用于药品质量在线监控和快速筛查。
关键词：近红外 双黄连口服液 山银花 一致性检验
Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.08.539
【中图分类号】R9 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2013）08-0464-02
双黄连口服液处方由金银花、黄芩、连翘三味药材组成。处方中的金银花药材自《中国药典》1963年版一部首载，其来源为“忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥花蕾或带初开的花”。在以后的1977年版直至1985、1990、1995、2000年版药典中，其来源增加了三种，分别为红腺忍冬Lonicera Hypoglauca Miq、山银花Lonicera confuse DC、毛花柱忍冬Lonicera dasystyla Rehd。而在《中国药典》2005年版至2010年版中将金银花分列为金银花和山银花，其中金银花的来源修改为与1963年版相同、而山银花的来源则为四种[1]。由于在各版《中国药典》中金银花药材来源的改变，尤其是2005年版将金银花与山银花分列后，其现行标准中的检验项目并不能将两种药材区分开。在实际应用中，一直存在着金银花与山银花药材混用的现象。我们用高效液相色谱法（蒸发光散射检测器）检测，对金银花、山银花的组分进行研究，发现金银花药材不含有灰毡毛忍冬皂苷乙，而山银花（灰毡毛忍冬）药材含有灰毡毛忍冬皂苷乙。故以灰毡毛忍冬皂苷乙为指标，对处方的金银花投料进行监测。但高效液相色谱法操作复杂，仪器设备要求高，检测周期长，如果每批样品都进行检验，浪费人力和物力。针对这一情况，我们利用OPUS软件，建立检测双黄连口服液中的山银花一致性模型。该模型经过大量的实验数据验证，证实该方法简单易操作、稳定可行、准确率高，适用于双黄连口服液中的山银花快速筛查。
1 试验原理
一致性检验的原理：①参考近红外光谱并计算光谱在每个波长点i吸光度的平均值和标准偏差σ；②对各个波长点处吸光度平均值上下加减一定倍数的标准偏差σ，作为该波长点的可信区间（confidence interval），该倍数即为一致性指数CI的限度；③测试光谱在该波长点处的吸光度与平均值的差值除以标准偏差σ得到一致性指数（conformityIndex：CI）；④一致性检验是将待测光谱的CI与之前设定的CI限度（CI limit）进行比较，从而快速简单的判断待测光谱与参考光谱是否具有一致性[2]。
2 仪器和试剂
Agilent1100型高效液相色谱仪（4元泵、蒸发光散射检测器、自动进样）；Dikama Diamonsil C18（2）色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）；Matrix—F型傅立叶变换MPA近红外分光光度计（德国BRUKER公司）。分析软件OPUS5.0。
50批双黄连口服液来自黑龙江瑞格制药有限公司、哈药集团三精制药股份有限公司、哈高科白天鹅药业集团有限公司、苏州长征-欣凯制药有限公司、东莞市亚洲制药有限公司、哈尔滨汇利药业有限公司、河南太龙药业股份有限公司、河南福森药业有限公司共8个厂家，所有样品均已用高效液相色谱法进行山银花（灰毡毛忍冬）的测定。
3 双黄连口服液中的山银花一致性检测方法的建立
3.1 双黄连口服液近红外光谱的采集。用仪器的光纤探头直接测定药液，在4000～12000cm-1之间进行扫描，测定其近红外漫反射光谱。仪器采用内置背景做为参比，分辨率为8cm-1，扫描32次，每批样品随机抽取3支，每支扫描1次，共得到150张原始光谱图。
3.2 光谱数据的处理方法。选择波数范围4188.7～6190.5cm-1和7355.3～9989.7cm-1，一致性指数（CI）选择为3.5，图谱处理用二阶导数+矢量归一化法。
3.3 建立双黄连口服液中的山银花一致性检测模型。选用经过高效液相测定的不含灰毡毛忍冬皂苷乙的样品，18批样品近红外光谱图用一致性检验的分析方法建立定性分析模型，其余的样品作为测试集。测试样品结果与高效液相检测结果一致。高效液相色谱法未检出灰毡毛忍冬皂苷乙的样品CI值均小于3.5，而检出灰毡毛忍冬皂苷乙的样品CI值均大于3.5。由此我们可以看出此模型对检测双黄连口服液中的山银花（灰毡毛忍冬）有一定专属性。
4 讨论
4.1 近红外光谱（Near Infrared Spectroscopy，NIR）介于可见光谱区与中红外光谱区之间，波数范围约为12800～4000cm-1。主要是由O-H、N-H、C-H、S-H等含氢基团振动光谱的倍频及合频吸收产生。因此药品近红外的光谱可以提供很多药品各类化学成分数据，具有同时分析多种化学成分的能力[3]。
4.2 一致性检验通过比对测试图谱与参照图谱中每一个波数点CI值，可以敏锐地发现不合格产品与合格产品之间的区别。
4.3 收集样品的覆盖面决定了建立模型的适用性，是模型评定的重要指标。本次虽然依靠8个厂家50批样品建立了双黄连口服液中的山银花检测一致性模型，但在实际运用中由于各自厂家工艺和辅料的不同，可能绘出现模型库中不一致的图谱，需要在实际运用中不断的补充和完善。
参考文献
[1] ChP（中国药典）.2005.Vol I（一部）；611
[2] 周伟，陈雯.应用近红外漫反射光谱法对红霉素薄膜衣进行一致性检验.中国药师，2009，12（4）；451
[3] 刘伟，范可青，包艳春等.运用近红外光谱法对青霉素V钾片一致性检验的研究.药物分析杂志，2009，29（1）；125
结论：双黄连口服液中的山银花检测一致性检验模型具有简单易操作、方法稳定可行、准确率高等特点，适用于药品质量在线监控和快速筛查。
关键词：近红外 双黄连口服液 山银花 一致性检验
Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.08.539
【中图分类号】R9 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2013）08-0464-02
双黄连口服液处方由金银花、黄芩、连翘三味药材组成。处方中的金银花药材自《中国药典》1963年版一部首载，其来源为“忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥花蕾或带初开的花”。在以后的1977年版直至1985、1990、1995、2000年版药典中，其来源增加了三种，分别为红腺忍冬Lonicera Hypoglauca Miq、山银花Lonicera confuse DC、毛花柱忍冬Lonicera dasystyla Rehd。而在《中国药典》2005年版至2010年版中将金银花分列为金银花和山银花，其中金银花的来源修改为与1963年版相同、而山银花的来源则为四种[1]。由于在各版《中国药典》中金银花药材来源的改变，尤其是2005年版将金银花与山银花分列后，其现行标准中的检验项目并不能将两种药材区分开。在实际应用中，一直存在着金银花与山银花药材混用的现象。我们用高效液相色谱法（蒸发光散射检测器）检测，对金银花、山银花的组分进行研究，发现金银花药材不含有灰毡毛忍冬皂苷乙，而山银花（灰毡毛忍冬）药材含有灰毡毛忍冬皂苷乙。故以灰毡毛忍冬皂苷乙为指标，对处方的金银花投料进行监测。但高效液相色谱法操作复杂，仪器设备要求高，检测周期长，如果每批样品都进行检验，浪费人力和物力。针对这一情况，我们利用OPUS软件，建立检测双黄连口服液中的山银花一致性模型。该模型经过大量的实验数据验证，证实该方法简单易操作、稳定可行、准确率高，适用于双黄连口服液中的山银花快速筛查。
1 试验原理
一致性检验的原理：①参考近红外光谱并计算光谱在每个波长点i吸光度的平均值和标准偏差σ；②对各个波长点处吸光度平均值上下加减一定倍数的标准偏差σ，作为该波长点的可信区间（confidence interval），该倍数即为一致性指数CI的限度；③测试光谱在该波长点处的吸光度与平均值的差值除以标准偏差σ得到一致性指数（conformityIndex：CI）；④一致性检验是将待测光谱的CI与之前设定的CI限度（CI limit）进行比较，从而快速简单的判断待测光谱与参考光谱是否具有一致性[2]。
2 仪器和试剂
Agilent1100型高效液相色谱仪（4元泵、蒸发光散射检测器、自动进样）；Dikama Diamonsil C18（2）色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）；Matrix—F型傅立叶变换MPA近红外分光光度计（德国BRUKER公司）。分析软件OPUS5.0。
50批双黄连口服液来自黑龙江瑞格制药有限公司、哈药集团三精制药股份有限公司、哈高科白天鹅药业集团有限公司、苏州长征-欣凯制药有限公司、东莞市亚洲制药有限公司、哈尔滨汇利药业有限公司、河南太龙药业股份有限公司、河南福森药业有限公司共8个厂家，所有样品均已用高效液相色谱法进行山银花（灰毡毛忍冬）的测定。
3 双黄连口服液中的山银花一致性检测方法的建立
3.1 双黄连口服液近红外光谱的采集。用仪器的光纤探头直接测定药液，在4000～12000cm-1之间进行扫描，测定其近红外漫反射光谱。仪器采用内置背景做为参比，分辨率为8cm-1，扫描32次，每批样品随机抽取3支，每支扫描1次，共得到150张原始光谱图。
3.2 光谱数据的处理方法。选择波数范围4188.7～6190.5cm-1和7355.3～9989.7cm-1，一致性指数（CI）选择为3.5，图谱处理用二阶导数+矢量归一化法。
3.3 建立双黄连口服液中的山银花一致性检测模型。选用经过高效液相测定的不含灰毡毛忍冬皂苷乙的样品，18批样品近红外光谱图用一致性检验的分析方法建立定性分析模型，其余的样品作为测试集。测试样品结果与高效液相检测结果一致。高效液相色谱法未检出灰毡毛忍冬皂苷乙的样品CI值均小于3.5，而检出灰毡毛忍冬皂苷乙的样品CI值均大于3.5。由此我们可以看出此模型对检测双黄连口服液中的山银花（灰毡毛忍冬）有一定专属性。
4 讨论
4.1 近红外光谱（Near Infrared Spectroscopy，NIR）介于可见光谱区与中红外光谱区之间，波数范围约为12800～4000cm-1。主要是由O-H、N-H、C-H、S-H等含氢基团振动光谱的倍频及合频吸收产生。因此药品近红外的光谱可以提供很多药品各类化学成分数据，具有同时分析多种化学成分的能力[3]。
4.2 一致性检验通过比对测试图谱与参照图谱中每一个波数点CI值，可以敏锐地发现不合格产品与合格产品之间的区别。
4.3 收集样品的覆盖面决定了建立模型的适用性，是模型评定的重要指标。本次虽然依靠8个厂家50批样品建立了双黄连口服液中的山银花检测一致性模型，但在实际运用中由于各自厂家工艺和辅料的不同，可能绘出现模型库中不一致的图谱，需要在实际运用中不断的补充和完善。
参考文献
[1] ChP（中国药典）.2005.Vol I（一部）；611
[2] 周伟，陈雯.应用近红外漫反射光谱法对红霉素薄膜衣进行一致性检验.中国药师，2009，12（4）；451
[3] 刘伟，范可青，包艳春等.运用近红外光谱法对青霉素V钾片一致性检验的研究.药物分析杂志，2009，29（1）；125