【摘 要】
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目的 对分离自临床不同科室不同标本的117株肠球菌,对其VRE的耐药基因进行检测,并探讨耐药基因的分布情况.方法 采用PCR法扩增万古霉素的耐药基因VanA、VanB和mazEF.引物
【出 处】
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第六届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛
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目的 对分离自临床不同科室不同标本的117株肠球菌,对其VRE的耐药基因进行检测,并探讨耐药基因的分布情况.方法 采用PCR法扩增万古霉素的耐药基因VanA、VanB和mazEF.引物设计与合成：参考文献设计引物(表6-1),委托上海生工生物工程股份有限公司合成.PCR体系：反应总体积为50μl,包括2×Taq PCR MasterMix 25μl,引物(10μM)各1 μl、模板2μl,ddH2O 22 μl.循环条件：94℃预变性2 min, 94℃30s,(VanA (56℃)、VanB (49℃),mazEF (58℃))30s,72℃1 min,35个循环,最后72℃延长5 min.扩增产物在1％琼脂糖凝胶,150 V电压电泳30 min,将凝胶板置于254 nm波长紫外灯下进行观察.全自动凝胶图像分析系统显像观察,并拍照留存记录结果.结果 本实验共搜集肠球菌117株,对万古霉素耐药率则非常低,仅检出5株VRE,占427％ (5/117),其中粪肠球菌1株(0.85％),屎肠球菌2株(1.71％),鹑鸡肠球菌1株(0.85％),铅黄肠球菌1株(0.85％).其中标本为伤口分泌物2株,血液1株,胆汁1株,脓液1株.标本来源骨科2株,普外科2株,血液科1株.以上5株肠球菌行耐药基因检测结果,仅有一株屎肠球菌检测出mazEF阳性,未检测出VanA和VanB阳性菌株(表6-2).结论 本实验耐药基因检测结果,仅有一株屎肠球菌测出mazEF阳性,未检测出VanA和VanB阳性菌株.由于VRE标本量少,耐药基因的检出率低,因此本地区的VRE耐药基因分布情况有待于进一步开究.
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