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以戊二醛法(GA)和碳二亚胺法(EDCI)偶联牛血清蛋白(BSA)和甲胺磷(MTP)制备免疫偶合物,探讨了偶联条件。发现戊二醛法偶联不成功,碳二亚胺法在室温(25~30℃)、pH中性偏碱、反应时间1~2日时,偶联率最高可达6.3:1。免疫实验进一步证明,碳二亚胺法制备的抗原免疫Balb/c小鼠后产生了抗体。