【摘 要】
：
目的 现行化学物发育神经实验的标准有美国环保署(EPA)颁布的OPPTS 870.6300及国际经合组织(OCED)颁布的TG426,这些实验均采用活体哺乳动物进行研究,费用高、耗时长,且难以满足当前新化合物神经发育毒性检测需求.由于多能干细胞(PSC)拥有独特的自我更新及定向分化能力,可分化为不同类型的神经细胞,适用于神经发育毒性(DNT)的研究.已验证的发育毒性试验——小鼠胚胎干细胞试验(ES
【机 构】
：
广东出入境检验检疫技术中心,广东广州510623;广东药学院,广东广州510130 广东出入境检验
论文部分内容阅读
目的 现行化学物发育神经实验的标准有美国环保署(EPA)颁布的OPPTS 870.6300及国际经合组织(OCED)颁布的TG426,这些实验均采用活体哺乳动物进行研究,费用高、耗时长,且难以满足当前新化合物神经发育毒性检测需求.由于多能干细胞(PSC)拥有独特的自我更新及定向分化能力,可分化为不同类型的神经细胞,适用于神经发育毒性(DNT)的研究.已验证的发育毒性试验——小鼠胚胎干细胞试验(EST)试验并不完全满足DNT筛选要求.因此需建立基于干细胞的DNT筛选试验.方法 选择小鼠胚胎干细胞系,体外培养扩增,以成体神经干细胞(如大鼠神经干细胞、海马干细胞)和神经细胞为对照.体外诱导PSC向神经细胞方向分化,从可用的诱导方法(如"4-/4+法"、"五步法"、单层细胞分化法、默认模式介导方式、基质细胞诱导法和遗传工程介导法等)中,本研究选择基质细胞诱导法.经神经元特异性标志物或电生理鉴定后,疑似神经发育毒性化合物暴露,选择阳性对照(甲基汞、镉、纳曲酮等)和阴性对照(青霉素G).选择的检测终点包含一个或多个神经发育的关键事件,如细胞增殖和凋亡、胚胎干细胞分化、神经细胞迁移、轴突树突生长和突触发生、神经胶质细胞分化和髓鞘形成、神经递质合成与功能等.综合应用分子、基因、蛋白、形态、功能等检测技术,观察和分析神经细胞的变化.结果 基于细胞的测试系统优点在于高通量、敏感度高.本研究建立的胚胎干细胞体外定向分化为神经细胞的方法,以及由此建立的发育神经毒性研究,可用于神经发育毒性物质的检测.而且针对神经发育的不同时期,不同暴露时间,对特定毒性效应进行研究,通过多个检测终点的调整,可以满足化合物不同作用机制的研究.干细胞的三维培养可提供更接近与体内的环境,克服成体永生细胞系(如PC12、神经瘤细胞)等细胞类型的不足.结论 采用干细胞诱导神经分化建立高通量神经发育毒物筛选方法有效可行,一方面可以满足对大量化学物快速筛选的要求,为安全性评价提供更多资料,另一方面符合3R原则和基于毒性通路的现代毒理学发展趋势.
其他文献
Environmental and chemical carcinogens have been shown to act as both initiators and promoters of cancer.In the present study, we attempted to reveal critical pathways in chemical carcinogenesis that
环境或内源的化学物质或物理过程会损伤DNA.研究聚合酶如何处理这些DNA损伤可以揭示DNA复制错配、错位、突变、细胞死亡、老化和癌症等过程的分子机理,为DNA损伤引起的疾病的治疗提供重要参考依据.酒精、烟、烧烤、农药或其它烷基化剂均可形成N2-烷基嘌呤而改变了DNA的分子结构,然而这些DNA损伤如何影响DNA复制的机制并不清楚,其中的重点和难点是这类损伤是否、以及如何导致DNA复制的错配或中断,这
全球化学品统一分类和标签制度(GHS)的实施旨在减少不同国家地区之间对化学品分类和标签的差异，在国际范围内统一对化学品危害特征的认识，从而提高化学品防护，降低国际贸易成本.化学品测试方法是实施GHS制度过程中重要的技术支撑.GHS本身并未提出化学品的试验要求甚至不鼓励进行不必要的动物实验，而是通过证据权重，分析来自人类和动物的数据，并结合专家判断对化学品进行分类和标签.化学品测试方法作为GHS分类
《新化学物质申报登记指南》中，对固体物质急性吸入毒性豁免的要求为：物质的粒径分布中，可吸入部分＜1％(重量百分比)，且使用时产生的浮质、微粒或者液滴MMAD(质量Mass median aerodynamic diameter》 ＞100 μm.本文总结了粒径测试的相关方法，并给出了不同种类的固体物质进行粒径测定的建议.满足《新化学物质申报登记指南》中，对固体物质急性吸入毒性豁免的要求为：物质的粒
为研究经济学研究对毒物管理与立法的影响，本文回顾了20世纪90年代以来，一些涉及毒物和毒性事件有关的经济学研究对毒物管理与立法产生的积极影响。并就简述了环境污染对经济供需关系的影响、切尔诺贝利核事故带来的经济学影响、烟草经济学研究为控烟决策提供依据。以英国伦敦烟雾事件、"反应停"灾难、日本水俣汞污染事件、中国西部毒草灾害、"瘦肉精"中毒事件、毒奶粉事件等重大毒性事件的经济学研究为例，分述了这些毒性
本研究通过对辽河表层沉积物的重金属污染状况调查,对比分析丰水期、枯水期6种重金属(Cr,Ba,Ni,Cu,Zn和Pb)总量,评价了辽河水系沉积物中的重金属含量及污染程度,并利用统计分析的方法进行了污染来源分析,以期为综合治理辽河流域重金属污染提供基础数据.采用ICP-MS方法测定了辽河流域19个采样点位枯水期以及丰水期表层沉积物中6种重金属(Cr,Ba,Ni,Cu,Zn和Pb)的含量.用地累计指数
Progress in the use of non-testing methods in chemical risk assessment has accelerated in recent years as global chemical legislations have been updated to highlight the principles of animal welfare a
The Threshold of Toxicological Concern (TTC) concept for chemical safety assessment has encountered significant development over the last forty years.The TTC has been used in the risk assessment of ch
It is well established that cancer is a multistep process which involves initiation, promotion, and progression stages.Mode-of-Action (MOA) is defined as the sequence of key cellular and biochemical e
目的 利用斑马鱼,建立一种体内类过敏快速检测模型,并利用此模型,检测药用辅料Tween-80及其杂质(氯乙醇、乙二醇和双氧水)的致敏性。方法 选择野生型AB品系斑马鱼幼鱼进行实验。优化检测用斑马鱼的发育阶段与数量、检测底物N-苯甲酰-DL-精氨酸对硝基苯酰胺盐酸盐(BAPNA)的浓度和阳性对照化合物Compound 48/80的浓度,建立基于微孔板分析的斑马鱼类过敏反应快速检测模型。该模型以肥大细