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背景 腓骨肌萎缩症(Charcot-Marie-Tooth disease,CMT)是最常见的遗传性周围神经病,具有高度的临床和遗传异质性,临床上以肢体远端肌肉进行性对称性的萎缩、无力、腱反射减弱和感觉减退等为主要特征,发病率约为1/2500.2004年,本研究小组成功将一个来自中国湖南和湖北的常染色体显性遗传的CMT2型大家系定位于12q24并命名为CMT2L型(OMIM号608673),2005年通过位置候选克隆发现HSPB8为CMT2L型的致病基因,前期工作中我们应用微纤维注射技术构建HSPB8基因K141N的转基因小鼠模型,已获得4只K141NHSPB8首建鼠,并顺利传代获得F2代pCAGGS-HA-K141NHSPB8小鼠4只,F3代pCAGGS-HA-K141NHSPB8小鼠9只.目的 对已构建的pCAGGS-HA-K141NHSPB8小鼠进行行为学、电生理学和病理学分析,以期明确K141NHSPB8转基因小鼠模型能否良好再现CMT2L临床表型和可靠用于HSPB8生物学功能和CMT2L发病机理研究.方法 取已基因鉴定的pCAGGS-HA-K141NHSPB8转基因鼠(F2代4只,F3代9只)和正常野生型小鼠(normaltype,NT)(F2代9只,F3代9只),共4组,进行包括足迹实验、固定棒试验、旋转棒试验、痛阈实验的行为学分析；使用BL-420E+生物机能实验系统仪进行电刺激后进行坐骨神经复合肌肉动作电位振幅(CMAP)、潜伏期及运动神经传导速度(MNCV)测定的电生理学分析；坐骨神经半薄切片甲苯胺蓝染色光镜下观察和超薄切片电镜下进行周围神经病理学分析.结果 足迹试验中K141NHSPB8转基因鼠存在明显步态异常,提示后肢周围神经受损,固定棒试验中发现K141NHSPB8转基因鼠多数蜷曲不动或行走时后肢在前肢的拖拽下费力前进,表明其运动协调能力差,K141NHSPB8转基因鼠在旋转棒上停留时间明显少于正常小鼠,表明其神经肌肉协调能力较正常小鼠差,足底电击痛阈实验未发现K141NHSPB8转基因鼠周围感觉神经受累.以上行为学分析K141NHSPB8转基因鼠说明后肢周围运动神经受累,感觉神经功能相对保存；电生理学分析结果发现K141NHSPB8转基因鼠近端和远端CMAP波幅较NT小鼠低,运动传到速度无统计学差异,表明周围神经损伤以轴索病变为主；病理学分析结果显示突变小鼠半薄切片显示薄髓纤维和无髓纤维明显增多,可见再生簇,电镜下绝大多数板层结构崩解,板层结构消失,轴索裸露和水肿变性.结论 K141N HSPB8转基因小鼠模型良好再现了CMT2L临床表型,能可靠用于HSPB8生物学功能和CMT2L发病机理研究,这也是国际上首次成功建立的CMT2L转基因小鼠模型和HSPB8过表达转基因小鼠模型.