【摘 要】
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本试验旨在研究胰高血糖素样肽-2(Glucagon-like peptide-2,GLP-2)对离体培养的断奶仔猪空肠上皮紧密连接相关蛋白及基因表达的影响,探讨GLP-2调节肠道黏膜屏障的可能机
【机 构】
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四川农业大学动物营养研究所,农业部动物抗病营养与饲料重点实验室,雅安625014
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会
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本试验旨在研究胰高血糖素样肽-2(Glucagon-like peptide-2,GLP-2)对离体培养的断奶仔猪空肠上皮紧密连接相关蛋白及基因表达的影响,探讨GLP-2调节肠道黏膜屏障的可能机理.将断奶仔猪空肠组织块置于含0、1mol/L×10-8mol/L、1×10-7mol/L的GLP-2的细胞培养液中培养72h,考察不同GLP-2添加水平对断奶仔猪空肠上皮丝裂原蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路激酶ERK1/2、p90RSK以及紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1基因表达的影响.将断奶仔猪空肠组织块置于1×10-7mol/L的GLP-2的细胞培养液中培养,并同时向培养液中添加MAPK的特异性抑制剂U0126,考察添加GLP-2后ERK1/2、p90RSK的磷酸化水平以及紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1蛋白表达的变化,以及阻断MAPK信号通路后紧密连接ZO-1、Occludin和Claudin-1蛋白表达和组织分布的变化.结果显示,将空肠组织块置于含1×10-8mol/L和1×10-7mol/L的GLP-2培养72h,与对照组相比均能显著促进ERK1/2、p90RSK以及密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1的基因表达(P＜0.05),除ZO-1 mRNA相对表达水平外,Occludin和Claudin-1的mRNA和蛋白的相对表达量,ZO-1的蛋白表达量还随着GLP-2浓度的升高而升高.将空肠组织块置于含1×10-7mol/L GLP-2培养72h,与对照组相比能显著促进ERK1/2、p90RSK的磷酸化水平,并使紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1的表达增加,蛋白分布增强(P＜0.05)；但使用U0126阻断MAPK信号通路后ZO-1、Occludin和Claudin-1的蛋白表达减少,并且在细胞间的分布减弱.结果提示GLP-2可能通过促进断奶仔猪空肠上皮紧密连接ZO-1、Occludin和Claudin-1的基因表达,实现对肠道通透性的调节,从而提高肠道的屏障功能.GLP-2能够促进断奶仔猪空肠上皮紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1的分布和表达,而MAPK通路可能是GLP-2调控肠道紧密连接蛋白基因表达的重要信号通路之一.
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